本研究通过化学偶联法制备CY2-大豆甙元探针，经纯度鉴定和毒性检测后，用于大豆甙元的亚细胞定位分析及活细胞动态示踪。
采用猪肌肉组织构建多层组织模型，将CY5.5-Daidzein探针置于组织模型下方，通过近红外荧光成像系统检测不同组织厚度下的荧光信号强度
通过酰胺化反应制备ICG-大豆甙元，经纯化后对其荧光特性进行检测，结果显示该探针的激发波长为780nm，发射波长为820nm，在生理缓冲液（PBS）中具有良好的荧光稳定性，孵育24h后荧光强度仍保持初始值的85%以上。
罗丹明（RB）标记的L-谷氨酰胺（RB-L-Glutamine）通过荧光标记技术，实现了谷氨酰胺在生物体系中的可视化追踪，为深入研究谷氨酰胺的代谢机制及肿瘤代谢重编程提供了有力工具。
5-BDBD是一种特异性的P2X7受体拮抗剂，可通过阻断P2X7受体的激活，发挥抗炎、*肿瘤等生物活性。将FITC与5-BDBD偶联，可利用FITC的荧光示踪特性，直观观察5-BDBD与P2X7受体的结合过程及分布情况。
建立基于CY3-Daidzein的荧光免疫共定位实验方法，明确大豆甙元与ERα的靶向结合特性，并评价其结合效率。
RB-Bilirubin的制备采用酰胺化反应，将胆红素的羧基与罗丹明的氨基活化后进行偶联，经高效液相色谱纯化后，纯度可达95%以上。
通过化学偶联法成功制备FITC-大豆甙元探针，经高效液相色谱（HPLC）纯化后，纯度可达95%以上，满足体外细胞实验要求。
Sulfo Cy3-C6-N3的点击化学标记策略设计需充分结合其分子结构特性。该分子通过C6碳链将Sulfo Cy3荧光基团与叠氮基连接，C6连接臂的引入既保证了活性基团的反应自由度，又避免了荧光基团与生物分子之间的空间位阻效应。在标记策略制定过程中，首先需明确目标生物分子的修饰位点，常用的修饰位点包括蛋白质的氨基、巯基，核酸的炔基修饰位点等。以蛋白质标记为例，若选择巯基作为修饰位点，可先通过马来酰亚胺等试剂对蛋白质进行炔基化修饰，再与Sulfo Cy3-C6-N3发生铜催化的叠氮-炔烃环加成反应；若选择氨基修饰，则可采用炔基化的N-羟基琥珀酰亚胺酯对蛋白质进行修饰，后续进行点击化学偶联。
CY5-Formononetin的制备为骨质疏松靶向治疗的示踪研究提供了有力工具，本文围绕其活体近红外成像性能及骨质疏松靶向治疗示踪应用展开探讨
