RB-Bilirubin,罗丹明修饰胆红素的使用说明
基础信息 |
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产品名称 |
RB-Bilirubin(罗丹明修饰胆红素) |
修饰基团 |
罗丹明(RB),发射波长约580nm,属于红色荧光染料 |
核心特性 |
保留胆红素的抗氧化、抗炎活性,兼具罗丹明的荧光示踪功能 |
储存条件 |
-20℃密封避光保存,避免反复冻融 |
适用范围 |
生物体系中胆红素的代谢追踪、抗氧化机制研究、炎症部位靶向示踪 |
胆红素是人体内重要的内源性抗氧化剂,具有清除自由基、抑制脂质过氧化及抗炎等多种生理功能,其在体内的代谢过程和作用机制备受关注。罗丹明(RB)作为一种常用的红色荧光染料,具有荧光强度高、光稳定性好、对细胞毒性低等优点,将其与胆红素进行修饰偶联,可实现胆红素在生物体系中的荧光示踪。本使用说明详细介绍RB-Bilirubin的制备、使用方法、注意事项等,为其在生物医学研究中的应用提供指导。
RB-Bilirubin的制备采用酰胺化反应,将胆红素的羧基与罗丹明的氨基活化后进行偶联,经高效液相色谱纯化后,纯度可达95%以上。使用前需进行探针的溶解与稀释,推荐使用二甲基亚砜(DMSO)作为母液溶剂,母液浓度可配置为10mmol/L,使用时根据实验需求用生理缓冲液(如PBS)稀释至工作浓度(通常为0.1-10μmol/L),注意DMSO终浓度不宜超过0.5%,避免对细胞造成毒性。
在细胞实验中,将稀释后的RB-Bilirubin与细胞共孵育,孵育条件为37℃、5% CO2培养箱,孵育时间根据实验目的调整(代谢追踪实验可孵育0.5-24h,定位实验推荐孵育2-4h)。孵育结束后,用PBS洗涤细胞3次,去除未结合的探针,随后可通过激光共聚焦显微镜观察荧光分布,或通过流式细胞术检测细胞内荧光强度。在活体实验中,可通过尾静脉注射或腹腔注射将RB-Bilirubin导入动物体内,注射剂量根据动物体重调整(通常为5-20mg/kg),利用小动物荧光成像系统动态监测其在体内的分布与代谢。

注意事项:1. 该探针对光敏感,所有操作需在避光条件下进行,避免荧光淬灭;2. 储存时需密封置于-20℃冰箱,避免反复冻融,否则会影响探针的荧光特性和生物活性;3. 使用过程中需设置空白对照组(仅加入溶剂)和阴性对照组(未修饰的胆红素),以排除非特异性干扰;4. 若用于体内实验,需提前进行急性毒性实验,确定安全使用剂量。RB-Bilirubin兼具胆红素的生物活性和罗丹明的荧光示踪功能,可广泛应用于胆红素代谢机制、抗氧化抗炎作用研究及相关疾病的靶向示踪。
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