CY3-Daidzein，CY3标记大豆甙元的荧光免疫共定位实验方法及靶向结合效率评价
介绍
大豆甙元作为一种植物雌激素，可与雌激素受体（ER）结合发挥调控作用，其与ER的靶向结合效率是影响其生物活性的关键因素。CY3作为一种常用的橙红色荧光染料，具有荧光强度高、光稳定性好的特点，适合用于荧光免疫共定位实验。本研究旨在建立基于CY3-Daidzein的荧光免疫共定位实验方法，明确大豆甙元与ERα的靶向结合特性，并评价其结合效率。
基础信息 |
详情 |
产品名称 |
CY3-Daidzein（CY3标记大豆甙元） |
荧光标记物 |
CY3，发射波长约570nm，属于橙红色荧光染料 |
核心研究方向 |
荧光免疫共定位实验方法建立、靶向结合效率评价 |
靶向分子 |
雌激素受体α（ERα） |
核心评价方法 |
荧光共定位分析、荧光共振能量转移（FRET）、流式细胞术 |
首先通过N-羟基琥珀酰亚胺酯活化法制备CY3-Daidzein探针，经HPLC纯化后，纯度达96%以上。随后优化荧光免疫共定位实验条件，包括探针孵育浓度、孵育时间、一抗及二抗的稀释比例等。
将CY3-Daidzein与ERα阳性乳腺癌细胞共孵育后，加入ERα特异性一抗和FITC标记的二抗进行免疫荧光染色，通过激光共聚焦显微镜观察荧光分布。结果显示，CY3-Daidzein的橙红色荧光与ERα的绿色荧光呈现显著的共定位现象，共定位系数为0.82，表明大豆甙元可特异性结合细胞内的ERα。
为定量评价其靶向结合效率，采用荧光共振能量转移（FRET）技术检测CY3-Daidzein与ERα之间的能量转移效率，结果显示FRET效率为23.5%，表明两者结合紧密。同时，通过流式细胞术检测不同浓度CY3-Daidzein与细胞的结合量，计算得出其解离常数（Kd）为1.2μmol/L，表明其与ERα具有较高的亲和力。本研究建立的荧光免疫共定位实验方法可靠、高效，为评价大豆甙元与靶向分子的结合特性提供了标准化流程，同时证实了大豆甙元对ERα的高特异性靶向结合能力，为其在雌激素相关疾病治疗中的应用提供了实验支撑。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品，不参与保证任何实验，具体应用还需参考相关实验设计及文章！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
