FITC-大豆甙元（FITC-Daidzein）体外细胞摄取与靶向分布可视化研究

FITC-大豆甙元（FITC-Daidzein）体外细胞摄取与靶向分布可视化研究

基本信息

描述：

大豆甙元作为一种天然异黄酮类化合物，具有*肿瘤、抗炎及调节内分泌等多种生物活性，其靶向递送效率是影响药效发挥的关键因素。FITC（异硫氰酸荧光素）因具有荧光量子产率高、水溶性良好及激发发射波长适中的特性，被广泛用于生物分子的荧光标记与可视化追踪。本研究通过化学偶联法成功制备FITC-大豆甙元探针，经高效液相色谱（HPLC）纯化后，纯度可达95%以上，满足体外细胞实验要求。

在细胞摄取实验中，将不同浓度的FITC-大豆甙元与肿瘤细胞共孵育不同时间后，采用流式细胞术检测细胞内荧光强度，探究浓度和时间对摄取效率的影响。结果显示，该探针在肿瘤细胞内的摄取量随浓度升高和孵育时间延长而增加，且在4h时达到饱和，提示其细胞摄取过程可能为主动转运机制。激光共聚焦显微镜成像结果进一步证实，FITC-大豆甙元主要分布于细胞的细胞质中，细胞核内荧光信号较弱，且在肿瘤细胞中的富集程度显著高于正常细胞，表明其具有一定的肿瘤靶向性。

为深入探究其靶向分布机制，通过Western blot检测相关转运蛋白的表达水平，发现肿瘤细胞中有机阴离子转运多肽（OATP）的表达量显著高于正常细胞，抑制OATP活性后，FITC-大豆甙元的细胞摄取量明显降低，证实OATP可能参与其靶向转运过程。本研究通过荧光标记技术实现了大豆甙元体外细胞摄取与靶向分布的可视化，为后续优化其靶向递送系统、提高药效提供了实验依据和技术支撑。