BHQ-1 acid 荧光淬灭剂，BHQ-1 acid 荧光淬灭剂性能与应用
BHQ-1 acid（CAS:1190431-95-8），中文全称为黑洞淬灭剂1-酸，是黑洞淬灭剂（Black Hole Quencher, BHQ）系列的核心产品之一，属于非荧光型宽光谱荧光淬灭剂。该产品凭借优异的淬灭性能、宽光谱吸收范围及良好的生物偶联活性，广泛应用于荧光探针构建、生物传感器开发、实时荧光定量PCR（qPCR）、荧光共振能量转移（FRET）等领域，是荧光检测技术中不可或缺的关键试剂，以下为详细性能与应用介绍。
一、产品基本特性。
BHQ-1 acid的核心结构为多环偶氮骨架，含有硝基、甲氧基等取代基，这些基团赋予其宽波段吸收能力与高效淬灭特性，同时分子末端修饰羧基（-COOH）官能团，提供生物偶联位点。产品外观为深棕色固体粉末，无明显异味，化学纯度≥95%（HPLC检测），分子式为C20H15N5O7，分子量为437.36，化学稳定性高，不易氧化、水解，适配多种实验体系。
与传统荧光淬灭剂（如TAMRA、DABCYL）相比，BHQ-1 acid的核心优势在于：无自身荧光发射，不会产生背景荧光干扰，显著提升检测灵敏度；淬灭效率高，无需近距离接触即可实现高效淬灭；吸收光谱范围宽，适配多种荧光染料，通用性强；生物相容性好，偶联后不影响目标生物分子的活性，适配体内外实验需求。
二、核心性能参数。
1. 光学淬灭性能：吸收光谱范围为480-580nm，吸收峰位于534nm，可高效淬灭该波长范围内的荧光染料，包括FITC、FAM、Cy2、AF488等常用绿色荧光染料。淬灭机制主要为荧光共振能量转移（FRET）与静态猝灭，FRET作用距离可达10-100Å，淬灭效率≥98%，远高于传统淬灭剂（淬灭效率通常为80-90%）。
由于自身无荧光发射，在荧光检测过程中不会产生背景信号，可将检测信噪比提升3-5倍，实现低浓度目标物质的高灵敏度检测。光稳定性佳，在常规实验光照条件下，吸收性能可稳定保持72小时以上，无明显衰减；在紫外光照射下，稳定性优于传统淬灭剂，可满足长时间实验需求。
2. 化学与偶联性能：溶解性：易溶于DMSO、DMF等有机溶剂，微溶于水，可在pH7.0-9.0的水性缓冲液中稳定分散，可通过EDC/NHS活化羧基，改善水溶性，适配生物偶联实验。反应活性：末端羧基（-COOH）可通过酯化、酰胺化等反应，与含氨基（-NH2）、羟基（-OH）的生物分子（如蛋白质、多肽、核酸、抗体）共价结合，偶联效率≥90%。
偶联条件温和，室温、pH7.5-8.5条件下即可完成反应，无需高温、高压或特殊催化剂，且不破坏目标生物分子的天然构象与活性。偶联后产物稳定性良好，在生理环境中（37℃、pH7.4）可稳定存在，不易发生解离，确保淬灭性能长期稳定。
3. 理化稳定性：化学稳定性：在常温、避光、干燥条件下，化学性质稳定，不易水解、氧化，可长期储存；在强酸、强碱条件下（pH<4.0或pH>10.0），会发生轻微降解，需避免此类环境。热稳定性：熔点为210-215℃，分解温度≥280℃，在常规实验温度（-20℃至37℃）范围内，性能稳定，无明显降解。
三、主要应用领域。
1. 荧光探针构建：用于构建qPCR探针、FISH探针、活细胞成像探针等。例如，构建FRET探针时，将BHQ-1 acid与荧光报告基团（如FAM）分别标记在核酸探针的两端，当探针与目标核酸结合时，两者距离拉近，BHQ-1 acid高效淬灭荧光报告基团的荧光；当探针解离时，荧光恢复，实现对目标核酸的定量与定性检测。
2. 实时荧光定量PCR（qPCR）：作为淬灭基团标记在TaqMan探针的3’端，与5’端的荧光报告基团（如FAM）配对，PCR扩增过程中，Taq酶的5’-3’外切酶活性切割探针，使荧光报告基团与BHQ-1 acid分离，荧光信号释放，实现PCR产物的实时定量检测，广泛应用于基因检测、病原体检测等领域。
3. 生物传感器开发：结合DNA/RNA适配体、抗体等识别元件，构建高灵敏度生物传感器，用于检测小分子物质（如药物、代谢物）、蛋白质、重金属离子等。例如，适配体与目标物质结合后，构象发生变化，导致BHQ-1 acid与荧光报告基团的距离改变，荧光强度发生变化，通过荧光强度的变化实现对目标物质的定量检测。
4. 蛋白质标记与检测：通过EDC/NHS化学偶联，将BHQ-1 acid标记在蛋白质、抗体上，用于蛋白质相互作用研究、免疫荧光检测等。例如，标记抗体后，与荧光标记的抗原配对，实现免疫复合物的高灵敏度检测，减少背景干扰。
四、储存与使用注意事项。
储存条件：-20℃避光、干燥、密封保存，避免反复冻融，建议分装为单次使用量；储存期限：规定条件下保质期为12个月。使用注意：操作过程中全程避光，防止吸收性能衰减；活化羧基时，使用EDC/NHS体系，反应条件控制在pH7.5-8.5；避免接触强酸、强碱，防止产品降解；仅供科研使用，不可用于临床诊断。
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