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FITC-鼠李糖酸B,FITC-Lithospermic acid B

时间:2026-01-27    阅读:20    点赞:0

FITC-鼠李糖酸B,FITC-Lithospermic acid B)

FITC-鼠李糖酸B是荧光素异硫氰酸酯(FITC)与鼠李糖酸B通过共价结合形成的荧光标记化合物,分子量约为856.7 Da,外观为黄色至黄绿色粉末,兼具FITC的绿色荧光性能与鼠李糖酸B的生物活性,是一种用于追踪鼠李糖酸B在生物体内作用过程的特异性荧光探针。鼠李糖酸B是从丹参等天然植物中提取的酚酸类化合物,具有多种生物活性,FITC的标记使其可实现对其在生物体系中定位、分布及代谢的可视化分析。

理化性质上

FITC-鼠李糖酸B继承了FITC的光学特性,激发波长约为490-495 nm,发射波长约为515-520 nm,处于可见光绿色区域,荧光强度高,荧光量子产率高,可通过荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计等常规设备检测。溶解性方面,该化合物在DMSO、乙醇等有机溶剂中易溶,在水中微溶,配制储备液时需先以无水DMSO溶解,再用PBS缓冲液、生理盐水等生物相容性溶剂稀释至工作浓度,稀释时需缓慢搅拌,避免出现沉淀。光稳定性方面,FITC-鼠李糖酸B的光稳定性一般,在强光照射下易发生光漂白,实验过程中需注意避光操作,可加入抗淬灭剂延长荧光信号持续时间。此外,该化合物在生理pH范围(6.5-7.8)内性能稳定,当pH低于6.0或高于8.5时,荧光强度可能会出现明显衰减,需控制反应和检测体系的pH。

作用机制:

分为荧光标记机制和生物活性保留机制:荧光标记机制是FITC分子中的异硫氰酸酯基团(-NCS)与鼠李糖酸B分子中的氨基发生共价反应,形成硫脲键,将FITC荧光基团稳定连接在鼠李糖酸B分子上,标记后的化合物在激发光照射下,FITC基团释放绿色荧光,实现对鼠李糖酸B的追踪;生物活性保留机制是标记反应仅针对鼠李糖酸B分子上非活性中心的氨基,不影响其酚羟基等活性基团的结构,因此可很大程度保留鼠李糖酸B原有的生物活性,确保实验中其生物功能的正常发挥。

应用领域:

主要集中在天然产物药理研究、药物代谢分析、细胞生物学研究等方向。在天然产物药理研究中,可用于追踪鼠李糖酸B在细胞内的作用靶点、分布位置,探究其分子机制,如研究其对活性氧(ROS)的清除作用及在细胞内的定位关系;在药物代谢分析中,可通过荧光信号追踪鼠李糖酸B在动物体内的吸收、分布、代谢、排泄过程,明确其在肝脏、肾脏、心脏等组织中的富集情况,为其药理毒性评估提供依据;在细胞生物学研究中,可用于观察鼠李糖酸B对细胞增殖、凋亡、迁移的影响,通过荧光定位分析其与细胞内特定细胞器(如线粒体、细胞核)的相互作用;此外,还可用于中药复方中鼠李糖酸B的体内外追踪,为中药复方的作用机制研究提供技术支持。

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使用方法:

需结合荧光标记特性和生物实验需求操作,首先配制储备液:取适量FITC-鼠李糖酸B粉末,加入无水DMSO溶解,配制成0.5-2 mM的储备液,分装为小体积,置于-20℃避光密封保存,避免反复冻融。细胞实验中,将储备液用细胞培养液稀释至工作浓度(通常为1-10 μM),加入到细胞培养体系中,37℃、5% CO₂培养箱中孵育1-4小时,孵育结束后用PBS缓冲液洗涤细胞3次,去除游离的荧光探针,再通过荧光显微镜观察细胞内荧光分布,或用流式细胞仪定量分析荧光强度。动物实验中,将配制好的工作液通过腹腔注射、静脉注射等方式导入动物体内,在不同时间点处死动物,取目标组织制成病理切片,或直接用活体荧光成像系统检测荧光信号,分析鼠李糖酸B在体内的分布情况。

注意事项

FITC-鼠李糖酸B对光和温度敏感,储存时需避光、低温(-20℃),长期保存可置于-80℃,防止荧光淬灭和结构降解;储备液避免反复冻融,使用前需室温复温并轻柔混匀;实验过程中全程避光,细胞孵育、洗涤、检测等步骤均需在避光条件下进行,可使用避光离心管、避光培养瓶等耗材;检测时需选用绿色荧光通道,避免与其他荧光信号干扰,同时加入抗淬灭剂以延长荧光信号寿命;细胞实验中需设置空白对照组(仅加培养液)和阴性对照组(加FITC空白染料),排除非特异性荧光干扰;动物实验中需控制探针用量,避免过量导致荧光信号饱和或对动物产生毒性。

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)    

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