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CY5-黄芩素,cy2/cy3/cy7-Baicalein不同荧光标记怎么选择

时间:2025-07-23    阅读:303    点赞:0

‌CY5-黄芩素是一种将黄芩素与红色近红外荧光染料CY5共价连接形成的荧光探针。它的可利用CY5的红色荧光信号,直观、灵敏地追踪黄芩素在细胞、组织和活体动物中的分布、转运和代谢行为,从而促进对小檗药效机制、药物递送效率、药代动力学等方面的研究。

 

‌CY2-黄芩素 (Baicalein-CY2):‌

‌光谱:‌ 激发(~492 nm 蓝光),发射(~510 nm 绿光)。

‌优点:‌

荧光非常‌明亮‌。

设备兼容性好。

成本通常相对较低。

‌缺点:‌

‌组织穿透能力最弱‌,主要用于‌细胞水平的显微成像‌(如共聚焦显微镜、荧光显微镜)。

‌背景自发荧光干扰最大‌(生物组织在绿光区域有较强的自发荧光),信噪比相对较低。

不适合活体深部组织成像。

‌应用:‌ 主要用于细胞摄取、亚细胞定位、细胞水平分布和动力学研究。当需要明亮的绿色信号且穿透深度要求不高时使用。

荧光染料

‌CY3-黄芩素 (Baicalein-CY3):‌

‌光谱:‌ 激发(~550 nm 绿光),发射(~570 nm 橙红光/黄色光)。

‌优点:‌

荧光‌亮度非常高‌(通常是CY染料家族中最亮的)。

比CY2的背景干扰稍小一些。

设备兼容性极佳。

‌缺点:‌

‌组织穿透能力依然有限‌,主要用于浅层组织或细胞成像。

背景干扰虽然比CY2低,但仍较显著。

不太适合深部活体成像。

‌应用:‌ 细胞摄取动力学(流式细胞术常用)、亚细胞定位、细胞共定位研究(常与绿色荧光FITC等配对)。

 

‌CY5-黄芩素 (Baicalein-CY5)‌ :

‌光谱:‌ 激发(~649 nm 红光),发射(~670 nm 深红光/近红外边缘)。

‌优点:‌

‌良好的组织穿透能力‌,显著优于CY2/CY3。

‌背景自发荧光干扰很低‌(组织在红光至近红外区的自发荧光很弱),‌信噪比高‌。

光稳定性好。

‌应用范围广‌:‌细胞显微成像‌效果,同时也是‌活体小动物成像‌的备选染料之一(适用于小型动物皮下或不太深的组织成像,深适合CY5.5)。

‌缺点:‌

穿透深度仍然不如真正的近红外染料(如CY7)。

亮度通常低于CY3。

‌应用:‌ 细胞成像、组织切片成像、活体分布追踪、药代动力学研究、药物递送系统评估‌。

 

‌CY7-黄芩素 (Baicalein-CY7):‌

‌光谱:‌ 激发(~750 nm 近红外光),发射(~773 nm 近红外光)。

‌优点:‌

组织穿透深度‌,光在近红外区域的组织散射和吸收最少。

‌背景自发荧光干扰最小‌,‌信噪比最高‌。

适合用于‌深部组织或大动物的活体成像‌。

‌缺点:‌

‌荧光亮度通常比CY3和CY5低‌(量子产率较低)。

激发和发射波长更长,需要专门优化的近红外成像设备(并非所有显微镜或活体成像仪都具备最佳性能)。

光稳定性可能略逊于CY5。

‌应用:‌ 主要用于‌深部成像‌、‌全身性药代动力学和生物分布研究、‌器官特异性靶向研究‌、需要穿透厚组织或骨骼的应用。

荧光光谱 

‌选择哪种标记物?关键考虑因素:‌

‌成像目标深度:‌

单一细胞或薄组织切片:‌CY2, CY3, CY5。

较厚组织切片或小鼠浅表组织:‌CY5‌。

小鼠深层组织或大动物:‌CY7‌。

 

‌背景干扰:‌

需要极高信噪比:‌CY5 或 CY7‌。

背景可控的细胞实验:‌CY2, CY3, CY5‌。

 

‌荧光亮度需求:‌

需要最强信号(如检测低丰度目标):‌CY3‌ (在可见光区)。

平衡亮度和穿透性:‌CY5‌。

穿透性优先:‌CY7‌ (接受稍低的亮度)。

 

‌可用设备:‌

标准荧光显微镜/共聚焦:‌CY2, CY3, CY5‌ 通常都兼容 (需对应滤光片)。

活体成像仪:‌CY5 和 CY7‌ 是主力,确认仪器对特定波段(尤其是CY7)的灵敏度。

‌多重标记(Multiplexing):‌

如果需要同时观察黄芩素和其他标记物(如GFP绿色等),选择光谱重叠最小的染料。

‌CY5‌ (红色) 或 ‌CY7‌ (近红外) 与绿色/蓝色荧光标记物的光谱分离度最好,是多重标记的常见染料。

星戈瑞 

‌活性验证 :‌

‌无论选择哪种染料,标记后黄芩素的生物活性是否保留是实验有效性的前提!‌ 通过体外活性测试确认标记物仍具有活性作用。

‌CY2/CY3:‌ 明亮的细胞水平标记物,穿透浅,背景干扰较大(CY2尤甚)。CY3亮度最高,应用多。

‌CY5:‌ 细胞和活体成像的‌全能主力‌。良好的穿透性、低背景、较好亮度,综合性能优异。

‌CY7:‌ ‌深部活体成像专家‌。穿透最深、背景最低,但亮度相对较弱,需专用设备。

 

选择哪种 ‌CY5-黄芩素‌ 最终取决于‌具体实验需求‌(细胞?组织?活体?深度?多重标记?)和‌可用的仪器设备‌。务必牢记进行‌标记后活性验证‌。

 

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)

标签: CY5 小檗碱
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