一、材料概述
IRDye800-HRP把近红外800 nm区域染料与HRP连接,适合在具备相应近红外检测通道的科研平台上进行示踪或结合检测。 使用前应确认仪器激发与检测窗口是否覆盖该染料光谱,并根据样品类型进行浓度梯度。复溶后的酶偶联物宜低温避光、分装保存,避免频繁冻融。若实验同时利用HRP催化底物,需要先验证底物反应条件不会明显削弱近红外信号。成像实验应设置未标记HRP、游离染料或二抗空白等对照,以判断背景来源。数据比较时保持曝光、增益和扫描参数一致。
二、基础信息与物理化学性质
中文名称 |
IRDye800标记辣根过氧化物酶 |
英文名称 |
IRDye800-HRP |
别称 |
IR800-HRP、Near-infrared 800-HRP conjugate |
材料类型 |
近红外荧光酶偶联物 |
性状 |
有色冻干粉或溶液,具体以批次和包装形式为准 |
溶解性 |
通常可在与蛋白活性兼容的水相缓冲液中复溶;实际溶解条件以产品说明和预实验为准 |
储存 |
建议低温、避光保存;复溶后分装,减少反复冻融 |
纯度 |
以具体批次质检报告或产品说明为准;偶联类材料还应结合游离染料残留、标记度或蛋白活性综合评价 |
保质期 |
以产品标签和批次说明为准,开封或复溶后的稳定性受保存条件影响 |
运输条件 |
依据材料形态与季节采用常温或低温避光运输,具体以发货要求为准 |
供应商 |
星戈瑞 |
应用方向 |
荧光示踪、成像、材料表征、结合/摄取研究或相关体外科研检测;具体用途需结合材料属性确定 |

三、产品使用指南
1. 使用前准备
使用前按照产品规定条件平衡至实验所需温度,并轻柔混匀。避免剧烈涡旋、长时间室温放置及强光照射。若为冻干产品,应使用厂家指定的缓冲液和体积复溶,不建议自行改变复溶体系。
2. 工作液配制
根据具体应用使用合适的缓冲液稀释 IRDye800-HRP。工作浓度通常需要根据样本类型、检测平台、背景水平和信号强度进行优化。首次实验建议采用梯度稀释确定最佳工作浓度,而不是直接套用其他 HRP 偶联物的稀释比例。
3. 近红外荧光检测
IRDye 800 类染料产生约 800 nm 波段的近红外荧光信号,可使用与其光谱范围兼容的近红外荧光成像设备检测。实验过程中应尽量避光,以减少荧光团光漂白。不同 IRDye 800 衍生物的激发/发射峰可能存在差异,应依据具体产品参数设置检测通道。
4. HRP 酶活检测
如果该偶联物经验证保留 HRP 活性,可利用 HRP 催化相应底物产生可检测信号。可根据实验体系选择兼容的显色、化学发光或荧光底物。标记过程可能改变 HRP 的比活性,因此应以该批产品的酶活数据为依据。
5. 推荐操作流程
一般流程可概括为:样品准备 → IRDye800-HRP 工作液配制 → 与目标体系孵育 → 必要时洗涤去除未结合偶联物 → 近红外荧光检测和/或加入 HRP 底物 → 信号采集与数据分析。
6. 使用注意事项
全程尽量避光操作,并避免反复冻融。使用 HRP 酶活检测时,应注意实验体系中可能抑制或干扰 HRP 的物质;同时设置空白对照、阴性对照和适当的阳性对照。若用于细胞、组织或其他复杂样本,还应进行非特异性结合和背景信号优化。
7. 保存建议
未使用的 IRDye800-HRP 应按照产品标签规定的温度避光保存。如果厂家允许冷冻保存,建议按单次使用量分装后保存,以减少反复冻融。配制后的工作液通常建议现配现用,除非产品稳定性资料明确支持长期保存。
特别提示: “IRDye 800”可能对应不同具体染料或商品体系,因此不能仅根据“IRDye800-HRP”这一名称确定精确的激发/发射波长、工作浓度、稀释倍数、保存温度和有效期。用于正式产品说明书时,这些参数应以实际偶联物的质控和稳定性验证结果为准。
四、相关材料与可延伸研究
IRDye800-NHS、HRP、Cy7-HRP、BODIPY-HRP、近红外二抗偶联物等。 星戈瑞可围绕同类荧光染料、不同连接臂、不同分子量或不同标记形式提供科研材料信息。实际选型时,应根据实验平台、检测波段、样品体系和后续纯化方式确定规格,并在下单或实验前核对结构、包装量及批次参数。
五、实验与保存注意事项
质量控制方面,可根据材料类型组合使用紫外-可见吸收、荧光光谱、色谱、质谱、核磁、凝胶渗透色谱、蛋白定量或酶活检测。对于蛋白/凝集素偶联物,单纯观察荧光峰并不能替代生物结合活性评价;对于聚合物,则应关注分子量分布、粒径、分散性和游离染料去除情况。 建议所有荧光材料全程尽量避光操作,复溶后按单次用量分装。若观察到颜色、溶解状态、光谱或活性出现明显变化,应暂停直接用于关键实验并先进行状态复核。
温馨提示:仅供科研,不能用于人体实验。