中文名称 |
ATTO680标记过氧化氢酶 |
英文名称 |
ATTO680-Catalase |
别称 |
ATTO 680-Catalase、ATTO680标记Catalase |
材料类型 |
远红荧光标记酶 |
性状 |
有色冻干粉或溶液，具体以批次和包装形式为准 |
ATTO680-Catalase通过将ATTO680荧光染料偶联至过氧化氢酶获得可追踪的酶蛋白材料。其工作原理可分为荧光示踪与酶催化两个层面理解。 荧光层面，ATTO680吸收光后产生远红区发射，可用于观察标记酶的位置或分布变化；酶学层面，Catalase催化过氧化氢分解。偶联可能改变局部电荷、空间位阻或部分活性，因此实验中应同时测定标记前后酶活并设置未标记Catalase对照。若研究细胞摄取，还需区分表面吸附和真正内化，可通过洗涤、共定位或时间梯度进行辅助判断。
工作原理解析
荧光层面，ATTO680吸收光后产生远红区发射，可用于观察标记酶的位置或分布变化
1. ⚛️ 过氧化氢酶（Catalase）：催化核心
过氧化氢酶是一种广泛存在于生物体内的抗氧化酶，其核心功能是催化过氧化氢（H₂O₂）分解为无害的水（H₂O）和氧气（O₂）。
催化反应：2 H₂O₂ → 2 H₂O + O₂
作用机制：该反应是一个歧化反应，即同一分子（H₂O₂）既作为氧化剂又作为还原剂。虽然其完整机制尚未完全阐明，但公认其催化过程分为两步：
过氧化氢酶活性中心的铁卟啉（heme） 与第一个H₂O₂分子反应，生成一个高活性的中间体（化合物I）和水。
这个高活性中间体再氧化第二个H₂O₂分子，生成水和氧气，同时自身恢复到初始状态。
通过这个高效的催化循环，过氧化氢酶能够快速清除细胞内有毒的H₂O₂，防止氧化损伤。
2. 💡 ATTO680荧光染料：示踪信号源
ATTO680是ATTO-TEC公司开发的新一代荧光染料之一，它为过氧化氢酶提供了可被光学设备检测的荧光信号。
核心光学参数：
最大激发波长（λ_ex）：约 681 nm
最大发射波长（λ_em）：约 698 nm
摩尔消光系数（ε）：1.25 × 10⁵ M⁻¹cm⁻¹（表明其吸收光的能力很强）
荧光量子产率（φ）：约 0.30（表明其发射荧光的效率较高）
关键特性：
近红外荧光：其激发和发射波长位于近红外区，在此区域生物样本的自发荧光很低，从而能显著提高检测的信噪比。
高稳定性：具有优异的光稳定性和热稳定性。
两性离子特性：ATTO680是一种两性离子染料，净电荷为零。这有助于减少其与生物分子的非特异性结合，降低实验背景。
整合工作原理：ATTO680-过氧化氢酶
当ATTO680与过氧化氢酶共价结合后，形成的ATTO680-过氧化氢酶复合物便具备了双重功能：
酶学功能：复合物中的过氧化氢酶部分保持其生物活性，能够识别并催化分解H₂O₂。这使得它可以被用于研究过氧化氢酶的活性、分布或参与相关酶促反应体系。
示踪功能：复合物中的ATTO680部分作为荧光标签，在约645-695 nm的光谱范围内被高效激发，并发射出约698 nm的近红外荧光。通过检测这个荧光信号，就可以对过氧化氢酶分子进行定位、追踪和定量分析。
相关材料
ATTO680-NHS活性酯（远红荧光标记前体，用于共价偶联过氧化氢酶表面氨基）
天然未修饰过氧化氢酶（CAT，酶母核原料，活性≥3000 U/mg）
透析袋/凝胶过滤介质（Sephadex G-50，去除未反应游离ATTO680染料）
含50%甘油的PBS保护缓冲液（维持酶活性长期稳定）
过氧化氢酶活性检测试剂盒（钼酸铵法，用于酶活定量核验）
0.22 μm无菌滤膜（除菌处理，延长储存周期）
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品，不参与保证任何实验，具体应用还需参考相关实验设计及文章！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
