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AF647标记硫胺素盐酸盐 AF647-Thiamine hydrochloride工作原理解析

时间:2026-09-01    阅读:4    点赞:0

中文名称:Alexa Fluor 647标记的硫胺素盐酸盐
英文名称:AF647-labeled Thiamine hydrochloride (AF647-Thiamine)
别称:AF647-维生素B1、近红外荧光维生素B1探针

性状:蓝色至紫色粉末,易溶于水及PBS,溶液呈深蓝色。
溶解性:水溶性>10 mg/mL,在生理盐水中稳定。
储存:4℃避光保存,避免氧化,保质期6个月。
纯度:HPLC≥95%,AF647标记率约7~10%。
运输条件:常温加干燥剂。
供应商:西安星戈瑞
应用方向:维生素B1转运研究、细胞摄取检测、缺乏症模型示踪。
温馨提示:仅供科研,不可用于人体。

该材料通过连接臂或适宜反应位点将AF647类远红光荧光基团与硫胺素盐酸盐相关结构结合。其工作原理主要基于荧光基团吸收特定波长光后产生荧光发射,使目标分子在体外实验体系中可以通过荧光信号被观察或检测。标记后分子的光谱参数、分子量和溶解行为与连接方式有关,应以具体产品资料为准。

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分子结构基础

‌功能母核‌:硫胺素盐酸盐,保留其与细胞表面硫胺素转运体的特异性识别结合能力,维持原有跨膜转运、胞内代谢的生物学活性

‌荧光报告基团‌:AF647(Alexa Fluor 647)远红光染料,通过NHS活性酯与硫胺素母核上的氨基位点形成酰胺键完成偶联,偶联后不干扰硫胺素的生物活性位点

核心光谱参数:激发波长≈650 nm,发射波长≈665 nm,处于远红光区间,可大幅降低生物样本自发荧光的背景干扰,适配深层组织与活体成像场景

 

完整工作原理链路

‌靶向识别入胞‌:探针进入生物体系后,硫胺素母核特异性识别细胞膜表面高表达的硫胺素转运体,通过主动转运介导探针高效进入细胞内部,而非非特异性自由扩散

‌荧光信号输出‌:AF647基团在650 nm激发光照射下,稳定发射665 nm左右的远红光荧光信号,该波段信号穿透性强,可有效避开生物样本中蛋白、核酸的自发荧光区间,信噪比远高于可见光区荧光标记物

‌动态示踪追踪‌:探针进入胞内后,可随硫胺素的天然代谢路径在细胞器、组织间转运,通过实时采集荧光信号,即可直接观测硫胺素的胞内分布、代谢动力学行为,无需额外染色处理

‌低干扰成像优势‌:相比FAM、TRITC等短波长荧光标记,AF647的远红光特性可支持多色荧光体系联用,与GFP、RFP等通道光谱重叠度极低,可同时实现多组分同步成像检测

 

核心技术特性

标记后硫胺素的生物活性保留率≥90%,不会因荧光基团修饰丧失与转运体的结合能力

AF647荧光亮度高、抗淬灭能力强,生理pH范围内荧光信号稳定性优异,支持长时间动态成像观测

水溶性好,可直接溶于细胞培养液与生理缓冲液,无需额外助溶剂,不会对细胞产生额外毒性

 

相关材料

上游原料:硫胺素盐酸盐、AF647-NHS酯、偶联缓冲液(如碳酸氢钠)。

最终制剂:AF647-Thiamine脂质体复合物、AF647-Thiamine-PEG纳米粒。

应用方向:神经退行性疾病中的硫胺素代谢研究、荧光示踪的维生素补充剂评价。

检测方法:荧光分光光度法定量、细胞荧光成像、流式细胞术测定摄取率、LC-MS监测代谢产物。西安星戈瑞提供从原料到标记物成品的全流程定制,并可协助客户建立细胞摄取检测平台。

 


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