中文名称:羧基荧光素标记的阴性对照小干扰RNA
英文名称:FAM-labeled Negative Control siRNA (FAM-NCsiRNA)
别称:FAM-NC siRNA、荧光非靶向siRNA
性状:绿色冻干粉末,溶解后为澄清绿色溶液。
溶解性:易溶于无核酸酶水、DEPC处理水及PBS(pH 7.4),配制成20 μM储备液后应分装保存。
储存:-80℃长期保存(>6个月),-20℃短期(<1个月),避免反复冻融。
纯度:≥95%(HPLC),FAM标记率≥90%。
保质期:自生产日期起12个月(-80℃)。
运输条件:干冰运输。
供应商:西安星戈瑞
应用方向:RNAi实验中的阴性对照、转染效率指示剂、细胞摄取可视化。
温馨提示:仅供科研用途,不得用于人体。
FAM-NCsiRNA是在阴性对照siRNA上引入FAM荧光基团的科研试剂。阴性对照序列通常用于实验流程、转染条件和荧光观察的对照设置,FAM信号则便于在荧光显微镜或相关检测设备下观察核酸进入实验体系后的分布情况。实际序列、标记端和纯化方式应根据实验设计确认。
核心功能与实验定位
它是RNAi实验体系中必设的关键对照组,核心作用不可替代:
转染效率可视化验证:转染后2-6 h即可通过荧光显微镜直接观察细胞内绿色荧光分布,直观判断siRNA是否成功进入细胞,无需后续核酸检测验证
转染条件预优化:正式实验前用FAM-NC siRNA设置0.5-3倍转染试剂用量梯度,快速摸索出目标细胞的最优转染参数,避免后续正式实验因转染效率不足导致数据无效
实验体系阴性参照:排除转染操作、试剂本身对细胞基因表达的非特异性干扰,确保后续目的基因siRNA的沉默结果是序列特异性作用导致
转染后示踪:可直接在活细胞下实时观测siRNA的细胞内分布与定位,追踪其入胞后的动态行为
关键使用注意事项
FAM荧光在转染后48 h内会逐步淬灭,需在转染后24 h内完成荧光观察检测,避免信号丢失
实验中需同步设置空白细胞对照组、仅加转染试剂的Mock对照组,排除非特异性干扰,保证实验数据严谨性
溶解后的工作液建议分装后-20℃避光保存,反复冻融超过5次会出现siRNA降解、荧光标记脱落的问题
该阴性对照序列经过大量文献验证,通用性强,无需针对不同物种重新设计,可直接复用在不同基因的RNAi实验中
全流程服务(西安星戈瑞)
西安星戈瑞提供从原料到最终检测的完整服务链:
1 原料阶段:合成高纯度核苷酸单体、FAM亚磷酰胺单体,以及专用引物。
2 合成阶段:采用固相合成仪,按需合成目标序列,并进行脱保护、纯化(HPLC或PAGE)。
3 退火与标记:正义链FAM标记,与反义链等摩尔混合退火,形成双链。
4 质量检测:包括纯度(HPLC)、分子量(MALDI-TOF)、退火效率(凝胶电泳)、内毒素测定(LAL法)、无菌检测。
5 细胞验证:可选服务包括转染效率测试、荧光成像、细胞活力测定,并提供详细报告。
客户可指定任意序列(如针对非人类基因)、不同荧光染料(Cy3、Cy5等)、不同修饰(胆固醇、PEG)。所有产品均附带质检证书(COA)和操作手册。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)