CY3-NHS，三甲川花菁染料-N-羟基琥珀酰亚胺酯
CY3-NHS（三甲川花菁染料-N-羟基琥珀酰亚胺酯）是三甲川花菁染料的 NHS 活化酯衍生物，作为氨基特异性荧光标记的 “即插即用” 试剂，凭借高反应效率、优良光学性能与广泛仪器兼容性，成为生物分子标记的主流选择。其分子核心由 CY3 荧光团与 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS）活化基团通过柔性连接臂连接，NHS 酯的高反应性使其能在温和条件下与伯氨基（-NH₂）快速偶联，形成稳定不可逆的酰胺键，标记特异性很强。
光学性能适配可见光区主流研究需求，激发波长约 550 nm、发射波长约 570 nm，橙红色荧光亮度高，消光系数达 150,000 M⁻¹cm⁻¹，荧光量子产率显著高于传统荧光素。其光稳定性优良，在连续激光照射下，光漂白速率比 FITC 慢 3 倍，适合长时间成像实验；pH 适用范围宽（pH 5–9），在细胞内不同微环境中保持信号稳定，无明显 pH 猝灭效应。光谱特性与 GFP、FITC 形成良好互补，可实现多通道共聚焦成像，无光谱串扰。
产品分为磺化与非磺化两种规格，适配不同实验场景：磺化 CY3-NHS（Sulfo-CY3-NHS）引入磺酸基团，水溶性很佳，可直接溶于水相反应体系，无需添加 DMF、DMSO 等有机共溶剂，避免对敏感生物分子（如抗体）的活性损伤，且不易聚集，标记均一性高；非磺化 CY3-NHS 呈紫色固体，易溶于有机溶剂，适合疏水分子的标记，或需高浓度有机相的反应体系。两者光谱性能一致，纯度均≥95%，可根据实验需求灵活选择。
化学偶联的核心优势在于高效与特异性：反应条件温和，很佳 pH 为 8.0–8.5，室温下 30–60 分钟即可完成，无需金属催化剂，避免生物分子氧化损伤。标记靶点广泛，可与抗体、蛋白、多肽、氨基修饰核酸、氨基化纳米颗粒等发生特异性偶联，摩尔比（染料：底物）可根据标记密度需求调节（1–20:1）。反应后，游离 NHS 酯会水解为无活性的羧基，可通过透析、超滤或凝胶过滤快速去除，纯化过程简单高效。
应用场景覆盖生物医学研究全链条：免疫荧光成像中，标记的一抗 / 二抗可用于细胞表面标志物、胞内蛋白的定位分析，如肿瘤标志物 HER2 的检测、细胞骨架微管蛋白的染色。流式细胞术中，其橙红色信号与 532 nm 激光系统高度兼容，适合细胞凋亡、细胞周期、表面抗原表达的高通量定量分析，背景信号低于传统罗丹明染料。
在核酸标记领域，可用于氨基修饰的 DNA/RNA 探针标记，制备荧光原位杂交（FISH）探针，用于染色体定位、基因表达检测。此外，还可修饰纳米载体（如脂质体、聚合物纳米粒），实现载体的荧光示踪；或作为荧光标准品，用于仪器校准与定量分析。储存需严格遵循-20℃避光真空干燥保存，磺化品可 4℃短期保存，避免湿气导致 NHS 酯水解失效。操作时需现配现用，活化液在冰浴避光条件下可稳定 1 小时，为生物分子标记提供高效、精准的技术解决方案。
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