Sulfo-Cyanine3 amine（2183440-43-7）在免疫荧光染色中的应用
Sulfo-Cyanine3 amine，简称 Sulfo-Cy3 amine，CAS 号 2183440-43-7，是磺化 Cy3 系列的氨基反应型荧光染料。它以伯氨基（-NH2）为反应基团，可与羧基、活性酯、醛基等高效偶联，同时具备高水溶性、高荧光亮度、低非特异性吸附、良好光稳定性等特点，是免疫荧光染色（IF）、免疫组化（IHC）、流式细胞术与组织成像中常用的橙红色荧光标记试剂。
免疫荧光染色的核心要求是标记特异性强、背景低、信号稳定、多色兼容。Sulfo-Cy3 amine 完美满足这些需求：磺酸基团赋予高水溶性与负电性，减少非特异性结合；氨基可实现抗体、蛋白、凝集素的位点可控标记；激发 / 发射波长约 550/570 nm，与 FITC（绿）、Cy5（远红）组合可实现三通道成像，互不干扰。
在免疫荧光染色流程中，Sulfo-Cy3 amine 主要用于制备荧光二抗或一抗。通过 EDC/NHS 活化抗体 Fc 段的羧基，与 Sulfo-Cy3 amine 的氨基形成稳定酰胺键。标记后的抗体保留结合活性与特异性，荧光信号强、光漂白慢，适合高分辨率成像与长时间观察。
在细胞免疫荧光中，Sulfo-Cy3 amine 标记抗体可用于胞膜蛋白、胞质蛋白、核蛋白、细胞骨架、线粒体、高尔基体等多种靶点染色。共聚焦显微镜下可获得清晰亚细胞定位，用于蛋白定位、共定位、转运与表达定量。适用于干细胞、肿瘤细胞、神经元、心肌细胞等多种细胞类型。
在组织切片免疫荧光中，Sulfo-Cy3 amine 的低背景特性尤为重要。组织样本成分复杂，易产生非特异性吸附，而磺化 Cy3 结构可显著降低非特异结合，提升信噪比。适用于冰冻切片、石蜡切片、脑组织、肝脏、肿瘤组织等多种样本，用于疾病诊断、靶点定位、蛋白表达分析。
在多重免疫荧光染色中，Sulfo-Cy3 amine 是核心配色之一。通常与 FITC（绿色）标记抗体联用，实现双靶点同时检测；与 Cy5（远红）、DAPI（蓝色）组合，实现四色成像，用于肿瘤微环境、免疫细胞浸润、信号通路共定位等复杂研究。
在神经科学研究中，Sulfo-Cy3 amine 标记抗体可用于神经元投射、突触蛋白、胶质细胞标记，荧光信号稳定、穿透力强，适合脑片与神经组织成像。
在临床病理诊断中，Sulfo-Cy3 amine 免疫荧光可用于肿瘤分型、病毒抗原检测、自身免疫病抗体检测，具有快速、灵敏、特异性高的优势，为病理诊断提供客观依据。
在实验操作方面，Sulfo-Cy3 amine 易溶于水与缓冲液，标记反应温和（pH 7.0–8.5），对抗体活性影响小。标记后通过凝胶过滤或超滤纯化，去除未反应染料。免疫荧光染色步骤包括封闭、一抗孵育、Cy3 标记二抗孵育、洗涤、封片，全程避光操作。
产品储存条件为-20℃干燥避光，稳定性高，标记后的抗体可长期保存。
综上，Sulfo-Cyanine3 amine（2183440-43-7）凭借高水溶性、高荧光亮度、低背景、高兼容性，成为免疫荧光染色领域的金标准试剂之一，为基础科研与临床病理提供稳定、可靠、高质量的荧光信号支持。
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