Sulfo-Cyanine3-DA（Sulfo-Cy3-DA）荧光探针应用
Sulfo-Cyanine3-DA，简称 Sulfo-Cy3-DA，是磺化 Cy3 荧光染料标记的二乙酸酯（Diacetate）衍生物，属于可激活、膜透过型荧光探针。它兼具 Cy3 的高亮度橙红色荧光、磺酸基的高水溶性与二乙酸酯的细胞渗透性，进入活细胞后被酯酶水解激活，产生强烈荧光，适用于细胞活力检测、酯酶活性分析、细胞标记、体内成像与流式细胞术，是一种通用型、高信噪比的活细胞荧光探针。
与传统 Calcein-AM 类似，Sulfo-Cy3-DA 采用酯酶激活机制，但荧光信号为橙红色，可避免细胞自发荧光干扰，更适合组织与体内成像。其非极性形式可快速穿透细胞膜，进入胞内后被细胞内酯酶水解，脱去乙酸酯基团，生成强荧光的 Sulfo-Cy3，因极性增加而滞留在细胞内，从而实现稳定标记。
光学性能方面，Sulfo-Cy3-DA 激活后激发波长约 550 nm，发射波长约 570 nm，荧光强度高、光稳定性好，与 543 nm、555 nm、561 nm 激光匹配，适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪与活体成像系统。磺酸化结构使其水溶性高、细胞毒性低，适合长时间活细胞观测。
在细胞活力与增殖检测中，Sulfo-Cy3-DA 是理想探针。活细胞含高活性酯酶，可快速激活探针产生明亮荧光；死细胞酯酶失活，无荧光信号。通过荧光阳性率可准确判断细胞活力，用于药物毒性筛选、辐射损伤、细胞凋亡与低温保存效果评价。
在酯酶活性与功能研究中，Sulfo-Cy3-DA 可作为特异性底物，定量检测细胞、组织、体液中酯酶活性，用于肝肾功能评价、代谢疾病研究与药物代谢酶分析。
在细胞标记与示踪中，Sulfo-Cy3-DA 可快速标记悬浮细胞与贴壁细胞，用于细胞共培养、迁移、侵袭、分选与移植追踪。标记过程温和、快速，无需洗涤，不影响细胞增殖与功能，适合干细胞治疗与细胞移植后的体内示踪。
在组织与类器官成像中，Sulfo-Cy3-DA 可穿透多层细胞结构，标记类器官、肿瘤球与组织切片，显示活细胞区域与形态结构，为 3D 培养模型提供高质量成像。
在体内细胞成像中，Sulfo-Cy3-DA 标记的细胞可通过活体荧光成像系统实时监测其在体内的迁移、定植与存活，适用于免疫细胞治疗、干细胞移植、肿瘤转移研究。橙红色荧光组织穿透性优于绿色荧光，信噪比更高。
在流式细胞术分析中，Sulfo-Cy3-DA 可与 PI、Annexin V、抗体标记等组合，实现多参数同时检测，同时分析细胞活力、凋亡、周期与表型，提升实验效率。
实验操作简便：Sulfo-Cy3-DA 用 DMSO 配制成储备液，使用时用 HBSS 或 PBS 稀释至工作浓度（1–5 μM）。细胞或组织在 37℃避光孵育 15–30 分钟即可检测，无需复杂洗涤步骤。
产品稳定性好，-20℃避光保存，避免频繁冻融。探针本身荧光微弱，激活后荧光显著增强，背景低，检测灵敏度高。
综上，Sulfo-Cyanine3-DA 是一款高性能、通用型活细胞荧光探针，以酯酶激活、膜通透、橙红色高信噪比荧光为核心优势，广泛应用于细胞生物学、药物筛选、干细胞治疗与活体成像，是实验室必备的细胞活力与示踪工具。
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