Sulfo-Cy3-dCTP 在 DNA 生物过程追踪中的应用
Sulfo-Cy3-dCTP,磺化花青素 3 标记脱氧胞苷三磷酸,是一种水溶性荧光标记核苷酸,可作为 DNA 聚合酶的底物直接掺入新合成 DNA 链,实现对 DNA 复制、修复、重组、转录与染色体动态的实时荧光追踪。它兼具 Sulfo-Cy3 染料高亮度、高稳定性、高水溶性的优势与 dCTP 的生物活性,是 DNA 动态可视化研究的核心试剂。
普通 dCTP 无荧光信号,无法直接观察 DNA 合成行为,而 Sulfo-Cy3-dCTP 通过磺酸化 Cy3 荧光团标记,在不显著影响聚合酶识别的前提下,赋予 DNA 强烈橙红色荧光。其激发波长约 550 nm,发射波长约 570 nm,荧光量子产率高、光稳定性强,适合长时间显微成像。双磺酸基使其水溶性优异,可在生理缓冲液中稳定溶解,不聚集、不沉淀,保证标记均一性。
在DNA 复制与细胞增殖追踪中,Sulfo-Cy3-dCTP 可通过显微注射或电转染进入细胞,在 S 期被 DNA 聚合酶掺入新合成的 DNA 链。通过荧光信号可直观显示复制位点、复制时序与复制叉动态,用于研究复制起始、延伸、终止机制及药物对 DNA 复制的影响。结合 EdU、BrdU 等标记,可实现多时序、多阶段同步追踪。

在DNA 损伤与修复研究中,Sulfo-Cy3-dCTP 是重要工具。当 DNA 发生断裂、交联等损伤时,修复合成过程会掺入荧光 dCTP,通过荧光位点与强度可判断损伤位置、修复效率与修复通路选择。适用于紫外辐射、化疗药物、基因编辑引起的 DNA 损伤修复监测。
在基因编辑与重组分析中,Sulfo-Cy3-dCTP 可标记基因编辑后的 DNA 修复产物,通过荧光定位与测序结合,精准分析 CRISPR-Cas9 等系统的切割效率、同源重组效率与脱靶效应,为基因编辑优化提供直观依据。
在染色体结构与分离观察中,Sulfo-Cy3-dCTP 可标记整条染色体,用于观察有丝分裂、减数分裂过程中染色体的凝集、排列、分离与移动,揭示染色体分离异常与非整倍体形成机制,在生殖生物学与肿瘤遗传学中具有重要价值。
在 ** 核酸原位杂交(FISH)** 中,Sulfo-Cy3-dCTP 可用于制备荧光标记的 DNA 探针,实现对特定基因位点的定位与定量。适用于染色体核型分析、基因拷贝数变异、转基因检测与产前诊断。
在DNA 与蛋白相互作用研究中,标记的 DNA 可用于检测转录因子、组蛋白、修复酶等蛋白与 DNA 的结合动态,通过荧光共定位、荧光共振能量转移(FRET)等方法解析分子机制。
在实验应用中,Sulfo-Cy3-dCTP 可直接加入 PCR、等温扩增、切口平移与随机引物标记体系,制备荧光 DNA 探针。标记效率高、序列保真度好,适合各类 DNA 合成与扩增技术。
产品稳定性好,-20℃避光保存,可长期保持核苷酸活性与荧光性能。水溶性特点使其操作简便,无需有机溶剂,降低对酶与细胞的损伤。
综上,Sulfo-Cy3-dCTP 是连接分子生物学与细胞成像的关键试剂,实现从试管到活细胞的 DNA 动态可视化,为 DNA 复制、损伤修复、基因编辑、染色体行为等核心生命过程研究提供强大工具。
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