AF488-laminin 蛋白,AF488 标记层粘连蛋白荧光探针产品说明
AF488-laminin(AF488标记层粘连蛋白)是将荧光染料AF488与层粘连蛋白(laminin)通过高效共价偶联制备而成的荧光探针,兼具层粘连蛋白的天然生物学功能与AF488的高亮度荧光特性,是研究细胞外基质(ECM)、细胞黏附、分化及组织发育的核心工具试剂。该产品标记效率高、荧光性能稳定、生物相容性好,适配多种荧光成像与检测技术,以下为详细产品说明。
一、产品基本信息。
层粘连蛋白(laminin)是基底膜的主要组成成分,是一种大型糖蛋白,由α、β、γ三条多肽链组成,分子量约900kDa,广泛分布于上皮细胞、内皮细胞、神经细胞等的基底膜中。其核心生物学功能包括介导细胞黏附、调控细胞分化、迁移、增殖及轴突导向,参与组织发育、伤口愈合及肿瘤侵袭转移等生理病理过程。
AF488是一种性能优异的绿色荧光染料,属于Alexa Fluor系列,激发波长为495nm,发射波长为519nm,荧光强度高、光稳定性佳、荧光量子产率高(Φ≈0.92),且对pH值不敏感,适配生理环境下的成像需求。AF488-laminin通过AF488-NHS酯与层粘连蛋白分子中的赖氨酸残基氨基发生酰胺化反应实现偶联,偶联效率≥90%,标记度为2-5个染料分子/蛋白分子,不破坏层粘连蛋白的天然构象与生物学活性。
产品基本参数:外观为淡黄色粉末,纯度≥95%(HPLC检测),分子式随层粘连蛋白来源略有差异,分子量约900-950kDa;溶解性良好,易溶于PBS缓冲液(pH7.4)、生理盐水等水性体系,溶解度≥1mg/mL,无需添加有机共溶剂;化学稳定性高,在常温、避光条件下可稳定存在,在37℃、pH7.4的生理环境中可稳定保持72小时以上。
二、核心产品特性。
1. 荧光性能优异:AF488的荧光亮度是传统FITC染料的2倍以上,光稳定性显著优于FITC,不易发生荧光淬灭,可长时间成像(如活细胞动态成像);荧光光谱峰形对称,半峰宽窄,可与其他荧光染料(如Cy5、罗丹明)实现多重荧光成像,不发生光谱重叠。
2. 生物活性保留完好:严格控制偶联条件(温和的pH、温度及摩尔比),确保层粘连蛋白保留其与细胞表面整合素受体的结合能力,可正常介导细胞黏附、分化等生物学行为,与未标记层粘连蛋白的功能无显著差异。
3. 生物相容性好:AF488染料毒性低,生物相容性优异,标记后不影响细胞活性,可用于活细胞成像;层粘连蛋白为天然生物蛋白,无免疫原性(经去免疫原化处理),可用于体内外实验。
4. 适配性强:可适配共聚焦激光扫描显微镜、荧光显微镜、流式细胞术、荧光酶标仪等多种荧光检测设备,可用于体外细胞实验、组织切片成像、活体成像等多种场景。
三、应用领域。
1. 细胞生物学研究:用于研究细胞与细胞外基质的相互作用,如细胞黏附、迁移、分化的动态过程;通过荧光成像观察AF488-laminin在细胞表面的分布,分析细胞黏附位点与整合素受体的结合情况;用于干细胞分化研究,监测层粘连蛋白对干细胞定向分化(如神经干细胞分化为神经元)的调控作用。
2. 组织生物学研究:用于组织切片的免疫荧光染色,观察层粘连蛋白在不同组织(如神经组织、血管组织、上皮组织)基底膜中的分布与表达水平;研究组织发育过程中基底膜的形成与重构,以及病理状态下(如肿瘤、炎症)层粘连蛋白的表达变化。
3. 肿瘤研究:用于肿瘤侵袭转移机制研究,观察AF488-laminin在肿瘤细胞周围的分布,分析肿瘤细胞对基底膜的降解与侵袭能力;用于肿瘤靶向探针开发,基于层粘连蛋白与肿瘤细胞的特异性结合,实现肿瘤的精准成像与早期诊断。
4. 生物材料与药物递送:用于修饰组织工程支架,赋予支架细胞黏附能力,优化支架的生物相容性;用于标记药物递送载体(如脂质体、纳米颗粒),实现载体在体内外的分布与细胞摄取的可视化追踪,优化递送效率。

四、储存与使用说明。
储存条件:-20℃避光、干燥、密封保存,可充氮气保护;避免反复冻融,建议分装为单次使用量(10μg、50μg),分装后保质期更长;储存期限:规定条件下保质期为12个月,过期后需检测荧光性能与生物活性,合格后方可使用。
使用说明:将产品从-20℃取出,室温避光解冻,用PBS缓冲液(pH7.4)稀释至所需浓度(1-10μg/mL);用于细胞实验时,将稀释后的探针加入细胞培养体系,37℃、5%CO2孵育1-2小时,PBS洗涤3次后成像;用于组织切片染色时,按照常规免疫荧光染色流程操作,避光孵育,洗涤后封片成像;全程避光操作,防止荧光淬灭。
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