水溶性花菁染料CY3标记二苯并环辛炔 Sulfo-Cy3-DBCO
水溶性花菁染料CY3标记二苯并环辛炔（Sulfo-Cy3-DBCO）是一种兼具水溶性、强荧光特性与无铜点击化学反应活性的功能性荧光标记试剂，通过将磺化修饰的CY3荧光染料与二苯并环辛炔（DBCO）官能团共价偶联形成，解决了传统CY3标记试剂水溶性差、生物相容性低及偶联反应需铜离子催化等问题，广泛应用于生物医学、分子生物学等领域的生物偶联、荧光成像、细胞追踪等科研实验。
理化特性方面，Sulfo-Cy3-DBCO的分子结构由三部分组成：核心部分为CY3荧光母核，属于花菁染料家族的中波段荧光染料，具有长共轭体系和稳定的光学性质；功能部分为二苯并环辛炔（DBCO），一种张力环炔结构，具有高反应活性；亲水部分为磺酸基团（-SO3H），通过磺化修饰引入CY3母核，显著提升产品的水溶性与生物相容性。该产品外观呈橙红色固体，分子量约为850-950 Da（具体取决于连接臂结构），光学性能优良。
光学参数上，Sulfo-Cy3-DBCO的激发波长约为550 nm，发射波长约为570 nm，荧光明亮且颜色鲜艳，处于可见光区与近红外区的过渡波段，既适合常规荧光显微镜观察，也可用于低深度组织成像。其消光系数高达150000 L·mol⁻¹·cm⁻¹以上，荧光量子产率约为0.3-0.4，光稳定性优良，抗光漂白能力强，连续激发下荧光强度衰减缓慢，可满足长时间荧光成像与追踪需求。此外，该产品对pH值具有良好的耐受性，在pH 4.0-10.0的缓冲体系中荧光强度基本保持稳定，适用范围广泛。
水溶性是Sulfo-Cy3-DBCO的核心优势之一，由于磺酸基团的强亲水性，该产品可直接溶于水、PBS缓冲液等水相体系，溶解度可达10 mg/mL以上，无需添加有机溶剂助溶，有效避免了有机溶剂对生物分子（如蛋白质、细胞）的损伤，显著提升了生物相容性。化学稳定性上，该产品在常温、避光条件下能保持长期稳定，不易发生水解、氧化或降解；DBCO基团的环张力使其具有高反应活性，同时结构稳定，不易发生自身聚合，可长期储存使用。
合成工艺上，Sulfo-Cy3-DBCO通常通过两步反应制备：首先以CY3染料前体为原料，经过磺化反应引入磺酸基团，制备水溶性的Sulfo-Cy3染料，并在母核上引入活性官能团（如羧基）；随后，将DBCO衍生物与Sulfo-Cy3染料在有机-水混合溶剂体系中发生酰胺化反应，通过稳定的连接臂将两者共价偶联，反应条件温和（室温、中性pH），避免了高温、强酸强碱对荧光母核与DBCO基团的破坏；最后，通过透析、高效液相色谱（HPLC）等纯化手段，去除未反应原料与副产物，获得纯度≥95%（HPLC检测）的目标产物，确保产品的荧光活性与反应特异性。
应用领域上，Sulfo-Cy3-DBCO的核心优势在于无铜点击化学反应活性与良好的水溶性，其DBCO基团可在无铜离子催化的条件下，与含叠氮（-N₃）官能团的生物分子发生应变促进的叠氮-炔环加成（SPAAC）反应，反应高效、特异性强，偶联效率接近100%，且无需添加铜离子螯合剂，避免了铜离子对细胞的毒性与对生物分子结构的破坏，尤其适合活细胞标记与体内实验。
具体应用场景包括：活细胞成像，可直接溶于细胞培养液，与含叠氮标记的细胞表面蛋白、胞内分子发生偶联，实现细胞内分子定位、细胞增殖与迁移追踪、细胞间相互作用研究等；生物分子标记，用于标记蛋白质、抗体、多肽、核酸、多糖等生物分子，制备荧光探针，应用于免疫荧光检测、Western Blot、核酸杂交、流式细胞术等实验；体内成像，由于良好的水溶性与生物相容性，可用于小动物体内的生物分子追踪、药物递送监测等；此外，还可应用于材料科学领域，用于荧光纳米材料、高分子聚合物的修饰，制备功能性荧光传感器、药物载体等。
储存与使用注意事项：Sulfo-Cy3-DBCO需密封、避光、干燥保存，储存温度为-20℃，建议分装成小规格（1mg、5mg）保存，避免反复冻融导致荧光活性下降。使用时需在无菌、避光条件下操作，佩戴手套、护目镜等防护用品；可直接溶于水或PBS缓冲液，无需助溶剂，稀释后立即使用；避免与强还原剂、强酸、强碱接触，防止DBCO基团失效或荧光母核破坏；该产品仅供科研使用，禁止用于人体实验、临床诊断或工业应用。
总之，水溶性花菁染料CY3标记二苯并环辛炔（Sulfo-Cy3-DBCO）凭借其良好的水溶性、优良的荧光性能、无铜点击化学反应活性及高生物相容性，在活细胞标记、体内成像、生物偶联等领域具有独特的优势，为科研工作者开展各类生物医学研究提供了高效、可靠的工具，具有广阔的应用前景。
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