花菁染料ICG标记Arg-9(ICG-Arg-9)是将吲哚菁绿(ICG)与九聚精氨酸(Arg-9)通过精准化学偶联形成的近红外荧光探针,兼具Arg-9的细胞穿透能力与ICG的近红外荧光特性,核心用于细胞穿透肽递送追踪、靶向给药监测、活体成像研究等领域,为生物药物递送、基因治疗等领域提供高效可视化工具。Arg-9作为阳离子细胞穿透肽,可通过与细胞膜负电荷相互作用穿透细胞膜,高效递送核酸、蛋白质等生物大分子,ICG标记后可实时追踪其穿透过程与递送效果。
ICG作为临床批准的近红外荧光染料,具有激发波长(780nm)、发射波长(800nm)处于近红外光区,组织穿透能力强、生物背景荧光低、生物安全性高、可被肝脏代谢排出等核心优势,适合深层组织及活体样本成像。其与Arg-9的偶联通过酰胺键连接,作用于Arg-9的氨基末端,不破坏其胍基结构与细胞穿透活性,标记后的ICG-Arg-9荧光信号稳定,光漂白抗性强,可通过近红外成像系统、共聚焦显微镜等设备,清晰追踪Arg-9穿透细胞膜的路径、进入细胞后的分布及介导的药物递送过程,解决了细胞穿透肽作用机制难以可视化的难题。

该探针的应用场景针对性很强:
生物药物递送研究中,Arg-9可作为载体介导核酸(DNA、RNA)、蛋白质(抗体、酶)、化疗药物等进入细胞,ICG-Arg-9可用于评估其细胞穿透效率、胞内分布及药物释放情况,优化载体与药物的结合比例、递送条件,提升递送效率与靶向性;细胞穿透机制研究中,可通过荧光成像揭示Arg-9通过内吞途径或直接穿透途径进入细胞的机制,探究细胞膜电荷、温度、pH等因素对穿透效率的影响,为优化细胞穿透肽结构提供理论依据。在活体实验中,可通过近红外成像实时监测ICG-Arg-9在动物模型体内的分布、代谢及靶向组织富集情况,评估其生物利用度与安全性;此外,还可用于肿瘤靶向递送研究,借助Arg-9的细胞穿透能力与肿瘤组织的EPR效应,实现对肿瘤细胞的精准递送与成像监测。
使用与储存需严格把控条件:
ICG-Arg-9应密封保存在-20℃避光环境,加入干燥剂防止受潮,避免反复冻融(建议分装保存,单次使用)。配制溶液时需使用无菌无酶PBS缓冲液或生理盐水,调节pH至7.2-7.4,现配现用(避免ICG降解导致荧光活性下降),常规使用浓度为2-10μmol/L。细胞实验中,孵育时间根据细胞类型调整为30min-2h,可通过荧光成像量化细胞摄取效率;活体实验中,小鼠尾静脉注射剂量为0.3-1.5mg/kg,注射后不同时间点(5min-48h)进行近红外成像,追踪其动态分布。实验需设置ICG空白对照组、未标记Arg-9对照组,排除非特异性荧光干扰;近红外成像时优化曝光时间与增益参数,避免信号饱和或过弱。ICG-Arg-9为细胞穿透肽介导的药物递送研究提供了可视化支撑,推动生物药物递送技术的优化与创新。
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