CY3.5标记的醛基（CY3.5-CHO）是一种功能化荧光标记试剂，以近红外荧光染料CY3.5为荧光基团，末端修饰高活性醛基（-CHO），凭借醛基与氨基、肼基、酰肼基的特异性反应活性，可高效实现与蛋白质、多肽、核酸、抗体等生物分子的共价偶联，广泛应用于生物分子示踪、免疫分析、活体成像、生物传感器构建等生物医学研究领域。CY3.5相较于传统荧光染料，具有发射波长更长（约590nm）、组织穿透能力强、生物背景荧光低等优势，尤其适合深层组织及活体样本的高灵敏荧光检测。
该标记物的核心优势体现在结构设计与反应特性上：醛基具有高的反应特异性，在生理pH值（7.0-7.5）条件下即可与生物分子上的游离氨基发生席夫碱反应，后续经还原反应可形成稳定的共价键，反应过程无需苛刻催化剂，不会破坏生物分子的天然构象、活性及功能位点。CY3.5荧光基团具备优异的光物理特性，荧光量子产率达0.7以上，光漂白抗性强，偶联后可长时间保持稳定荧光信号，便于长时间动态追踪实验；同时其荧光光谱与FITC、CY5等染料无明显重叠，可实现多通道荧光成像，满足复杂样本的多指标同步检测需求。
在实际应用中，CY3.5-CHO的适配场景覆盖生物医学研究多个方向：蛋白质标记领域，可用于抗体、酶、抗原等蛋白质的荧光修饰，构建荧光免疫探针，应用于免疫组织化学、免疫荧光染色、流式细胞术检测等实验，精准定位目标蛋白质在细胞或组织中的分布；核酸标记领域，可与氨基修饰的DNA、RNA偶联，制备荧光核酸探针，用于基因定位、核酸杂交分析、基因表达水平检测等，为分子生物学研究提供可视化工具。在活体成像中，其近红外荧光特性可穿透动物组织表层（穿透深度可达数毫米），实现对体内生物分子分布、代谢过程及相互作用的实时监测，为疾病模型研究、药物递送效率评估提供直观数据。
使用与储存需遵循严格规范：CY3.5-CHO应密封置于-20℃避光环境，加入干燥剂防潮，避免反复冻融超过3次，防止荧光基团降解。偶联反应时，需控制标记试剂与生物分子的摩尔比例（通常为5:1至10:1），过量添加以保证偶联效率，反应完成后通过透析、凝胶过滤或超滤等方法去除未反应的游离标记试剂，降低背景荧光干扰。用于活体实验时，需优化注射剂量（常规小鼠尾静脉注射剂量为0.1-0.5mg/kg），兼顾荧光信号强度与生物安全性。该标记物作为高效生物偶联工具，为生物分子可视化研究提供了强大支撑，推动免疫分析、活体成像等技术的创新发展。
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