罗丹明标记转铁蛋白（RB-Tf）
罗丹明标记转铁蛋白（RB-Tf），又称罗丹明B标记转铁蛋白，是通过共价偶联技术将罗丹明类荧光染料（常用罗丹明B、罗丹明异硫氰酸酯RBITC）与转铁蛋白（Tf）结合形成的功能性生物探针，兼具转铁蛋白的靶向转运功能与罗丹明的强荧光特性，纯度≥95%，外观为红色至深红色固体粉末，在细胞生物学、肿瘤靶向治疗、药物递送等领域应用广泛。转铁蛋白（Tf）是一种广泛存在于脊椎动物血浆中的单链糖蛋白，分子量约77kDa，主要功能是介导铁离子的转运与代谢，其分子结构中含有两个铁离子结合位点，可与细胞表面的转铁蛋白受体（TfR）特异性结合，通过受体介导的内吞作用进入细胞，实现铁离子的胞内递送。由于肿瘤细胞增殖速度快，对铁离子的需求远高于正常细胞，其表面TfR的表达量显著上调（是正常细胞的2-10倍），这使得Tf成为肿瘤靶向递送的理想载体。罗丹明类染料作为常用的可见光区荧光染料，激发波长约550-560nm，发射波长约570-590nm，具有荧光信号强、光稳定性好、光穿透深度适中、易于检测等优势，标记后不会影响Tf与TfR的特异性结合能力，为靶向递送过程的可视化提供了保障。
该材料的制备通常采用异硫氰酸酯法或活性酯法，以RBITC标记为例，RBITC分子上的异硫氰酸基团（-NCS）可与Tf分子链上赖氨酸残基的氨基发生反应，形成稳定的硫脲键，偶联过程中需严格控制反应条件：反应体系选用PBS缓冲液（pH8.0-8.5），温度维持在4℃，反应时间4-6小时，磁力搅拌速度控制在100-200r/min，确保反应均匀；RBITC与Tf的摩尔比控制在4:1-6:1，摩尔比过高会导致Tf分子过度修饰，影响其与TfR的结合活性，摩尔比过低则标记效率不足，荧光信号微弱。反应结束后，通过凝胶过滤层析（Sephadex G-25）去除游离RBITC，再经透析纯化（透析袋截留分子量50kDa）24小时，更换缓冲液3次，确保游离染料彻底清除；纯化后经冷冻干燥处理得到固体产品，冻干过程中控制真空度与温度，避免Tf变性与荧光活性衰减。
储存条件需严格遵循低温避光原则，固体粉末密封后置于-20℃避光环境，加入干燥剂防止吸潮，分装保存以避免反复冻融（建议单次使用单份样品，冻融次数不超过2次），有效期约12个月。使用时需根据实验场景制备工作液，溶解介质可选用无菌PBS缓冲液（pH7.4）、无血清培养基或Tris-HCl缓冲液（pH7.5），溶解时缓慢加入溶剂，轻轻混匀，必要时超声辅助溶解（功率50W，时间1-2分钟），避免剧烈搅拌导致Tf分子链断裂；溶解后离心（3000r/min，5分钟）去除不溶物，工作浓度需结合实验目的调整：细胞实验中孵育浓度通常为0.1-1μM，药物递送实验中载体浓度可控制在1-10μM，荧光成像实验中可根据成像设备灵敏度微调浓度，确保荧光信号清晰且无明显背景干扰。
RB-Tf的核心应用集中在肿瘤靶向研究与药物递送领域：在肿瘤靶向药物递送系统中，可将化疗药物（如阿霉素、紫杉醇）、基因药物（如siRNA、DNA）或纳米颗粒（如脂质体、纳米粒）与RB-Tf结合，借助Tf与肿瘤细胞表面TfR的特异性结合，提高药物的肿瘤靶向富集能力，减少对正常组织的损伤，同时通过罗丹明的荧光信号，借助荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪等设备，实时监测药物在细胞内的摄取、转运路径、亚细胞定位及释放过程，为优化药物递送系统的设计、提高给药效率提供直观数据；在细胞生物学实验中，可用于研究铁离子转运的分子机制，通过荧光成像观察Tf与TfR的结合、内吞及胞内分选过程，分析TfR表达水平与细胞增殖、分化的关联，为铁代谢异常相关疾病（如贫血、肿瘤）的研究提供工具；在肿瘤诊断研究中，可作为荧光探针，结合TfR的高表达特性，实现肿瘤细胞的特异性识别与荧光成像，为肿瘤的早期诊断提供参考。
使用过程中需注意多项细节：一是操作全程尽量避光，尤其是孵育与成像环节，避免强光照射导致荧光淬灭，影响实验结果；二是工作液需现配现用，配置完成后若需短期保存，可置于4℃避光环境，保存时间不超过24小时；三是避免与强还原剂、重金属离子、高浓度酸碱性溶液接触，此类物质会破坏罗丹明的荧光结构与Tf的蛋白活性；四是细胞实验中需无菌操作，孵育时间根据细胞类型调整（通常为1-4小时），孵育结束后用PBS缓冲液冲洗细胞3-4次，去除未结合的RB-Tf，减少非特异性荧光干扰；五是该材料仅限科研使用，不可用于人体实验或临床诊疗，操作时需佩戴手套、口罩等防护用品，避免皮肤接触与吸入，实验废弃物需按生物安全规范处理。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品，不参与保证任何实验，具体应用还需参考相关实验设计及文章！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
