Cy3 标记香草酸(Cy3-Vanillic-Acid)使用指南
Cy3 标记香草酸是将 Cy3 荧光团与香草酸通过共价键连接的荧光标记衍生物,既保留了香草酸的生物活性与分子识别特性,又具备 Cy3 荧光团的强荧光信号优势,是生物成像、分子追踪、靶点定位等实验的理想探针,适用于细胞生理、植物代谢、生物分子标记等研究领域。本产品纯度≥98%,荧光稳定性佳,适配多种缓冲体系,以下为详细使用规范,总述实验操作核心要点。
一、核心产品参数
本产品关键理化与荧光参数如下表,为实验设计提供基础依据:
参数项 |
指标 |
纯度 |
≥98%(HPLC 检测) |
激发波长 |
550 nm |
发射波长 |
570 nm |
溶解性 |
易溶于 DMSO、DMF,微溶于 PBS 缓冲液 |
储存温度 |
-20℃避光冷冻 |
母液有效期 |
-20℃分装保存,6 个月内有效 |
二、储存与前处理
产品未开封时,需在 - 20℃避光冷冻保存,严禁室温放置或反复冻融,否则会导致荧光淬灭、分子结构降解。
首次使用前离心(12000 rpm,1 min),使管底粉末聚集,避免取量误差。
用无水 DMSO 配制 10 mM 母液,充分涡旋振荡至完全溶解,分装为 20μL / 管的小体积,避免后续反复冻融,分装后迅速放回 - 20℃保存。
三、实验操作步骤
标记体系配制:将母液用 pH 7.0-7.4 的 PBS 缓冲液稀释至实验所需浓度(常规工作浓度 1-10 μM),DMSO 终浓度需≤0.5%,防止对细胞、活体样品产生毒性。
样品标记:按 Cy3 - 香草酸:目标分子 = 1.2:1 的摩尔比加入体系,室温避光孵育 30-60 min;若为细胞或组织样品,孵育期间轻摇培养皿,保证标记充分。
游离探针去除:孵育结束后,用透析袋(MWCO 3500)透析 1-2 h 或葡聚糖凝胶柱层析,去除未结合的游离 Cy3 - 香草酸,避免背景荧光干扰。
荧光检测:采用荧光显微镜、流式细胞仪或荧光分光光度计检测,激发光设为 550 nm,发射光设为 570 nm,同时设置未标记样品为空白对照,校准背景信号。
四、关键注意事项
全程严格避光操作,实验台面铺避光纸,检测前的孵育、离心、移液均在暗室或避光环境下进行,防止 Cy3 荧光团光漂白。
缓冲体系中避免加入叠氮钠、β- 巯基乙醇等强还原剂,此类物质会破坏荧光团结构,导致荧光信号消失。
操作时佩戴一次性手套、护目镜,避免皮肤直接接触,若不慎接触,立即用清水冲洗。
若用于活体或细胞实验,需提前做毒性预实验,确定无毒性的工作浓度。

五、适用范围
本产品可广泛应用于细胞内香草酸靶点荧光成像、植物体内香草酸代谢路径追踪、蛋白 / 核酸等生物分子的荧光标记,以及药物递送体系中香草酸类载体的示踪实验,适配细胞体外培养、离体组织检测等常规实验模型。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)