CY5.5-S-腺苷蛋氨酸（CY5.5-SAM）的使用指南
CY5.5-S-腺苷蛋氨酸是一种将近红外荧光染料CY5.5与S-腺苷蛋氨酸（SAM）通过共价键精准连接形成的新型功能性荧光探针，兼具二者的核心特性与协同功能。SAM作为生物体内不可或缺的甲基供体，广泛参与DNA、RNA及蛋白质的甲基化修饰过程，其代谢异常与肿瘤、神经退行性疾病等多种病症的发生发展密切相关；而CY5.5作为经典近红外染料，具备发射波长较长（约694nm）、组织穿透性强、光稳定性优异、生物毒性低等优势，可有效避开生物组织自身荧光的干扰，适合深层组织及活细胞成像。二者的共价结合，成功实现了功能分子在生物体系内的可视化追踪与动态监测，为相关生理病理机制研究提供了全新工具。
该化合物外观呈深蓝色均匀粉末，无明显异味，易溶于水、DMSO、DMF等极性溶剂，在乙醇、甲醇中溶解度中等，不溶于正己烷、氯仿等非极性溶剂。
其稳定性受pH值和光照影响较大，在pH 6.0-8.0的生理缓冲体系中稳定性佳，可维持荧光强度稳定48小时以上，强光直射会导致荧光淬灭，建议在-20℃冷冻干燥条件下避光密封保存，保质期可达6个月以上。合成过程需严格控制反应条件，以高纯度SAM和CY5.5为原料，先采用N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）与碳二亚胺（EDC）组成的复合活化体系，活化CY5.5分子中的羧基，生成高活性的酯中间体；再将活化后的CY5.5与SAM按1:1.2的摩尔比混合，在室温下避光搅拌反应4-6小时，使CY5.5的活化酯与SAM分子中的氨基发生特异性酰胺化反应。反应结束后，通过透析法去除小分子杂质，再经高效液相色谱（HPLC）进一步分离纯化，收集目标峰并冷冻干燥，最终产物纯度可达98%以上，经荧光分光光度法验证，荧光量子产率保留率超过90%。
其核心应用集中在生物医学研究领域，尤其在肿瘤研究和药物研发中表现突出。在活细胞水平，可通过荧光显微镜、共聚焦显微镜等设备，实时监测甲基化过程的动态变化，精准追踪SAM在细胞内的转运路径、代谢分布及亚细胞定位，为解析肿瘤细胞甲基化异常的分子机制提供直观实验依据。在肿瘤诊断方面，CY5.5-SAM可通过靶向肿瘤细胞高表达的甲基化相关酶（如DNA甲基转移酶），实现肿瘤病灶的近红外荧光成像，助力早期肿瘤的精准定位，为术中导航提供参考。在药物筛选领域，可作为高通量筛选工具，快速评估候选药物对甲基化代谢通路的调控作用，筛选出具有潜在活性的甲基化抑制剂或激活剂。此外，该探针还可用于神经科学研究，追踪SAM在神经细胞中的代谢过程，为阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的机制研究提供支持。未来随着近红外成像技术的不断升级，CY5.5-SAM在临床转化研究中的应用潜力将进一步释放，有望为精准医疗提供更多技术支撑。
