RB-PEG-Biotin，罗丹明-聚乙二醇-生物素，多靶点生物分子亲和识别与分离的荧光工具
罗丹明-聚乙二醇-生物素（RB-PEG-Biotin）是一种集荧光标记、靶向亲和与生物相容性修饰于一体的多功能生物试剂，由罗丹明（RB）荧光染料、聚乙二醇（PEG）连接臂与生物素（Biotin）亲和基团通过共价键连接而成。该产品凭借生物素与链霉亲和素（Streptavidin）之间的高特异性、高亲和力相互作用，结合罗丹明的优良荧光性能与PEG的生物相容性修饰优势，成为生物分子分离纯化、免疫检测、细胞成像等领域的核心工具，尤其适用于多靶点生物分子的同时识别与分离。
基础属性上，该试剂的PEG分子量可灵活选择（1000、2000、5000 Da），对应分子量分别为1500、2500、5500 Da，纯度≥96%（HPLC检测）。外观为红色粉末，水溶性很佳，在去离子水中的溶解度≥20 mg/mL，可与多种生理缓冲液（PBS、Tris-HCl）任意比例混合。荧光性能方面，罗丹明染料的激发波长为555 nm，发射波长为580 nm，荧光量子产率≥0.70，摩尔消光系数≥1.0×105 L·mol-1·cm-1，荧光信号强度高，抗淬灭能力强，在连续激发150小时后荧光强度保留率仍超过80%。
生物素基团与链霉亲和素的结合具有很高的特异性与亲和力，结合常数高达1015 M-1，是抗原-抗体结合亲和力的1000倍以上，且结合过程快速、可逆性低，可在广泛的pH（2-13）与温度（4-80℃）范围内稳定存在。PEG连接臂长度为2-5 nm，可有效减少罗丹明与生物素之间的空间位阻，保证两个功能基团的活性不受影响，同时提升试剂的生物相容性，减少非特异性吸附。此外，PEG修饰还可提升试剂的体内循环稳定性，延长其在生物体内的作用时间。
围绕多靶点生物：分子亲和识别与分离的主题，该产品在生物分子分离纯化领域展现出独特优势。在蛋白质组学研究中，可通过生物素-链霉亲和素的特异性结合，实现对目标蛋白的高效分离与富集。将RB-PEG-Biotin与目标蛋白的特异性探针（如抗体、多肽）偶联后，与复杂生物样本（如细胞裂解液）孵育，探针可特异性结合目标蛋白，形成“目标蛋白-探针-RB-PEG-Biotin”复合物，通过链霉亲和素修饰的磁珠或色谱柱进行亲和分离，即可得到高纯度的目标蛋白。同时，借助罗丹明的荧光信号，可实时监测分离过程，评估分离效率，且分离后的蛋白可通过荧光成像进行后续的定位与功能研究。例如，在肝细胞癌相关蛋白的分离中，使用该试剂偶联的抗甲胎蛋白（AFP）抗体，从肝癌细胞裂解液中成功分离出AFP蛋白，分离纯度可达98%以上，荧光检测结果显示分离效率超过95%，为蛋白质组学研究提供了高纯度的目标蛋白样品。
在多靶点免疫检测中，RB-PEG-Biotin可用于构建多通道荧光免疫分析平台。通过将不同的生物分子探针分别与RB-PEG-Biotin偶联，利用生物素-链霉亲和素的高特异性结合，将探针固定于链霉亲和素修饰的检测芯片上，实现对多种目标分析物的同时检测。例如，在肿瘤标志物联合检测中，将抗CEA、抗CA19-9、抗CA125的抗体分别与RB-PEG-Biotin偶联，固定于芯片上，可同时检测血清中的CEA、CA19-9、CA125三种肿瘤标志物，检测时间缩短至30分钟，检测灵敏度均可达0.01 ng/mL，且各检测通道之间无交叉干扰，为肿瘤的早期筛查与鉴别诊断提供了高效的检测手段。
在细胞成像与靶向追踪中，该产品可用于细胞表面受体的定位与动态追踪。将RB-PEG-Biotin与细胞表面受体的特异性配体偶联后，与细胞孵育，配体可特异性结合受体，通过罗丹明的荧光信号可清晰观察到受体在细胞表面的分布与动态变化。同时，生物素基团可与链霉亲和素修饰的荧光纳米颗粒结合，实现信号放大，提升成像灵敏度。在表皮生长因子受体（EGFR）的动态追踪实验中，RB-PEG-Biotin标记的EGF与肝癌细胞孵育后，可清晰观察到EGFR在细胞表面的聚集与内吞过程，荧光信号稳定，背景噪声低，为受体介导的细胞信号通路研究提供了直观的可视化工具。
使用与储存方面，该试剂需在-20℃避光密封保存，保质期为18个月，建议真空干燥储存，防止受潮。使用时可直接溶于生理缓冲液或水相中，无需有机溶剂辅助溶解，反应条件温和（室温、pH 7.2-8.0）。与氨基化生物分子偶联时，可通过NHS活化法（需额外添加EDC/NHS）实现共价结合，偶联效率可达90%以上。产品提供多种PEG分子量与包装规格（1 mg、5 mg、25 mg），可满足不同实验需求。
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