Cy3-Cholesterol 是一种常用的工具，可用于细胞膜成像。
它结合了胆固醇的膜锚定能力和Cy3荧光团的明亮、稳定发光特性，使其在细胞生物学研究中受欢迎。
荧光标记：一旦嵌入细胞膜，Cy3染料就会在特定波长的光（通常是绿光，~550 nm）激发下发出明亮的橙红色荧光（~570 nm），从而在荧光显微镜下清晰地勾勒出细胞的轮廓。
优点
操作简单：通常只需将染料与细胞在培养液中共孵育一段时间，然后洗去未结合的染料即可观察。无需转染、显微注射等复杂操作。
标记速度快：插入细胞膜的过程相对迅速。
背景信号低：未插入膜的染料可以被洗掉，因此信噪比很高。
兼容性好：Cy3的发射光谱（橙红色）与GFP（绿色）和DAPI（蓝色）等常用荧光标记有很好的区分度，非常适合多色成像实验。
毒性低：在合适的浓度下，对细胞活性的影响较小。
局限性及注意事项
1. 并非绝对特异性：虽然其主要作用是标记细胞膜，但需要注意：
内化现象：细胞会通过内吞作用将部分膜成分摄入细胞内部，形成内体等囊泡结构。孵育时间越长，内化越明显。因此，它适合进行短时程的膜标记和成像。如果需要长时间观察静态的细胞膜，这可能是一个干扰因素。
代谢：在某些细胞类型中，胆固醇可能会被代谢或运输到其他细胞器（如线粒体），导致信号不再局限于质膜。
2. 浓度控制：使用浓度过高可能会破坏膜的正常结构或功能，并产生非特异性标记。需要根据实验条件和细胞类型进行浓度优化。
3. 不能区分细胞膜内外叶：它会随机标记脂双层的两个叶，无法特异性地只标记外叶或内叶。
常见应用场景
细胞形态观察：快速、清晰地显示细胞在培养皿中的整体形态、铺展面积、伪足和丝状伪足等结构。
细胞膜流动性研究：结合荧光恢复 after 光漂白（FRAP）技术，可以研究细胞膜上脂质的扩散速度和流动性。
细胞间相互作用：观察免疫突触、细胞粘附等过程。
膜内吞作用研究：利用其会被内化的特性，可以反过来追踪内吞途径和囊泡运输。
Cy3-Cholesterol 是进行细胞膜成像的一种工具，特别适用于短时程的活细胞膜标记和形态学观察。只要注意其可能发生内化的特性，并通过预实验优化好浓度和孵育时间，就能获得适宜的细胞膜成像结果。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考！(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)
