FITC-甘氨鹅去氧胆酸(FITC-GCDCA) 是一种荧光标记的胆汁酸衍生物,由天然胆汁酸 甘氨鹅去氧胆酸(Glycochenodeoxycholic Acid, GCDCA) 与绿色荧光染料 异硫氰酸荧光素(FITC) 通过化学偶联形成。
结构本质
FITC荧光基团:激发波长 490-495 nm,发射波长 515-520 nm(绿色荧光),通过硫脲键(-NH-CS-NH-)连接至GCDCA的伯氨基(-NH2)。
分子特点:荧光特性使其可被显微镜、流式细胞仪等设备检测
相关功能:为什么需要它?
天然胆汁酸(如GCDCA)在细胞内无法直接观测,而FITC-GCDCA解决了这一难题:
实时示踪 → 动态观察胆汁酸被肝细胞摄取、肠细胞吸收、细菌代谢的全过程;
定位 → 通过共聚焦显微镜可视化胆汁酸在细胞内的分布(如溶酶体、内质网);
定量分析 → 流式细胞术检测细胞对胆汁酸的摄取效率。
科研应用场景
肝胆转运机制研究:示踪肝细胞膜转运蛋白(如 NTCP/OATP)对胆汁酸的摄取;竞争性实验验证药物对转运体的抑制。
肠道通透性评估:在Caco-2细胞Transwell模型中,检测FITC-GCDCA从肠腔侧到基底侧的渗透率,评估肠道屏障损伤。
微生物代谢分析:定量肠道菌对GCDCA的 脱结合(去除甘氨酸)和 7α-脱羟能力。
使用注意事项
荧光稳定性 避光操作(光照易淬灭);酸性环境荧光减弱(溶酶体信号可能丢失)
对照设置 必需!包括:
- 阴性对照:FITC-葡聚糖(非胆汁酸分子)
- 竞争抑制对照:未标记GCDCA预处理
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)