FITC标记谷氨酰胺(FITC-Glutamine)是一种荧光标记的谷氨酰胺衍生物,应用于生命科学研究中,主要用于追踪细胞对谷氨酰胺的摄取、代谢及细胞内分布。
FITC(异硫氰酸荧光素):绿色荧光染料(激发/发射波长约495/525 nm),共价结合到谷氨酰胺分子上。
谷氨酰胺:细胞必需氨基酸,参与能量代谢、核苷酸合成和抗氧化防御。
荧光特性:保留FITC的绿色荧光(激发波长~495 nm,发射波长~525 nm),便于光学检测。
示踪功能:通过荧光信号实时、定量监测谷氨酰胺的摄取、转运及代谢动态。
科研应用
细胞代谢与蛋白质合成研究:追踪谷氨酰胺在细胞内的摄取、代谢及参与蛋白质合成的动态过程,研究细胞对谷氨酰胺的依赖性。
检测方法:
荧光显微镜:将FITC-L-Glutamine与细胞共孵育,观察其在细胞质或线粒体的定位,结合蛋白质合成抑制剂(如环己亚胺)验证其参与翻译的过程。
流式细胞术:定量检测细胞内荧光强度,分析不同细胞类型(如肿瘤细胞vs正常细胞)对谷氨酰胺的摄取差异。
药物筛选与代谢调控机制:开发抑制谷氨酰胺代谢的药物,通过荧光标记谷氨酰胺验证药物对细胞摄取或代谢的抑制效果。
检测方法:
竞争性结合实验:预孵育抗谷氨酰胺抗体或药物(如BPTES),检测FITC-L-Glutamine的细胞内荧光信号是否被抑制,验证靶点特异性。
高通量筛选:在384孔板中用荧光强度变化筛选抑制谷氨酰胺转运或代谢的化合物。
亚细胞器功能与信号传导研究:探索谷氨酰胺在线粒体(参与三羧酸循环)或溶酶体(参与自噬)中的具体作用,研究其与mTOR信号通路的关联。
检测方法:
荧光共定位:将FITC-L-Glutamine与线粒体(MitoTracker)或溶酶体(LysoTracker)标记物共染色,通过共聚焦显微镜观察共定位信号。
动态成像:结合时间序列拍摄,分析谷氨酰胺在不同亚细胞器间的转运速率。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)