Cy3-NHS酯（也称为Cyanine3 NHS Ester）是一种常用的荧光标记试剂，尤其在生物分子标记和成像领域。
Cy3 (Cyanine 3)，是它的核心部分，属于花菁染料家族。Cy3是一种明亮的橘黄色荧光染料。它在激发时吸收绿光（最大吸收波长通常在 ~550 nm 左右），发射红光（最大发射波长通常在 ~570 nm 左右）。
NHS Ester (N-羟基琥珀酰亚胺酯)，是它的反应性官能团。NHS酯是一种活化基团，可用来与生物分子（主要是蛋白质、抗体、肽段）表面的伯胺基团发生共价反应。
功能：
将Cy3-NHS酯与含有伯胺的生物分子混合，在温和的碱性条件下（通常是pH 8.3-9.0的碳酸氢钠缓冲液），NHS酯会与伯胺发生酰胺键形成反应。
Cy3染料分子通过一个稳定的酰胺键共价连接到目标生物分子上，从而给该生物分子标记上Cy3荧光团。
使用注意事项：
对湿度敏感：NHS酯容易水解失效。必须严格防潮，储存于干燥器中（通常-20°C干燥避光保存），使用前在干燥环境中回温，配制溶液后尽快使用。
对光敏感：Cy3染料会被强光漂白。操作和储存时需避光。
溶剂：通常先用无水DMF或DMSO溶解成高浓度储存液，再稀释到含目标分子的缓冲液中进行反应。反应缓冲液不能含有游离胺（如Tris, Glycine, Ammonia），因为它们会竞争性消耗NHS酯。
优化标记比例：需要优化染料与目标分子的摩尔比，以达到足够的信号强度，同时避免过度标记导致生物分子失活或聚集。
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