Cy3-黄芪甲苷(Cy3-Astragaloside) 的荧光激发和发射波长由其所标记的 Cy3染料(磺化花菁染料CY3的衍生物)决定,与黄芪甲苷本身无关。
Cy3-黄芪甲苷的荧光光谱参数
最大激发波长(Ex)548–560,最佳激发光范围。
最大发射波长(Em)562–580,峰值发射范围(检测通道:570±10 nm 或 580±10 nm)。
实际测量值受环境影响,比如溶剂极性、pH值、浓度。
注:实际应用中可考虑以 Ex: 540nm, Em: 560 nm 为初始参数,根据具体样本微调。
仪器兼容性:
激发光源:
激光共聚焦显微镜:常用 543 nm He-Ne激光 或 561 nm固体激光。
荧光显微镜:适配 TRITC/Cy3滤光片组(Ex: 530–560 nm, Em: 570–620 nm)。
检测通道:
流式细胞仪:使用 PE通道(Ex:488–561 nm, Em:570–615 nm)。
酶标仪:设置 Ex:550 nm, Em:570 nm。
多色成像兼容性:
FITC:488/510nm激发发射,绿色通道。
Cy3:552/570激发发射,橙黄色通道
Cy5:640/670激发发射,远红通道
避免串色:与绿色探针(FITC)发射光谱部分重叠,需设置光谱拆分或顺序扫描。
若观测到信号减弱,可能源于:
光漂白:长时间强光照射(优化:降低激光功率,加抗淬灭剂)。
探针降解:存储不当(-20℃避光干燥保存,溶液现配现用)。
环境淬灭:重金属离子、活性氧(优化缓冲体系)。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)