FITC-L-色氨酸(FITC-L-Tryptophan)是一种常用于细胞示踪、氨基酸转运研究或药物递送系统的荧光探针。
FITC(异硫氰酸荧光素):激发/发射波长 Ex 495 nm, Em 520 nm(绿色荧光)。
探针功能:
示踪氨基酸代谢途径
评估细胞膜转运活性
靶向细胞
检测方法
流式细胞术:
激发光:488 nm激光器
检测通道:FITC/GFP通道(530/30 nm)
分析:比较各对照组平均荧光强度(MFI),计算转运活性。
荧光显微镜:
滤光片:蓝色激发(450–490 nm)/绿色发射(515 nm长通)
注意:避光操作+抗淬灭封片剂(如ProLong Diamond) 防光漂白。
酶标仪定量:
激发/发射:485 nm/535 nm
裂解细胞后检测荧光值(需做蛋白浓度校正)。
常见问题与解决
荧光信号弱:探针浓度不足/时间过短;增加浓度或延长孵育。
高背景噪音:洗涤不充分/游离探针残留;增加洗涤次数。
非特异性摄入:被动扩散占主导;使用阴性对照;4℃孵育组对照。
注意事项
严格避光:所有操作在暗室/黄光下进行,孵育时培养板包裹铝箔。
探针稳定性:
工作液:现配现用,室温放置≤2小时。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)