FITC-海藻糖,这是一种将绿色荧光FITC与海藻糖 (Trehalose) 共价连接而成的化合物,主要用于细胞成像、示踪和机制研究。
FITC-海藻糖是什么?
FITC(异硫氰酸荧光素)
绿色荧光染料(激发波长 495 nm,发射波长 520 nm)。
特点:高亮度、水溶性较好,但易光漂白,适合短期细胞成像。
科研用途
追踪海藻糖的细胞内吞与转运:研究细胞如何摄取海藻糖(如通过溶酶体途径)、在细胞内的动态分布。
自噬研究:验证海藻糖是否通过自噬途径清除致病蛋白。
药物递送载体评估:将海藻糖作为“靶向溶酶体的载体”,装载药物后追踪递送效率。
细胞保护机制研究:探究海藻糖在氧化应激、热休克等胁迫下的保护
注意事项
避光操作:FITC易光漂白,全程避光(孵育、洗涤、成像)。
浓度优化:高浓度海藻糖可能渗透性改变细胞功能。
验证功能活性:需平行实验验证 FITC-海藻糖 是否保留天然海藻糖的生物学功能(如诱导自噬)。
内吞抑制剂对照:使用氯喹(溶酶体抑制剂)或低温(4℃)阻断内吞,确认摄取途径。
常见问题
Q:FITC-海藻糖能否用于活体成像?
不建议。FITC的激发/发射波长在可见光范围(495/520 nm),组织穿透性差,且易被血红蛋白吸收。若需活体成像,建议改用 CY5/CY7标记的海藻糖(近红外荧光)。
Q:如何区分特异性摄取与非特异结合?
设置竞争性抑制对照:提前用过量未标记海藻糖预处理细胞,再添加FITC-海藻糖,若荧光信号显著降低,说明摄取具有特异性。
替代方案
高分辨率短期细胞成像:FITC-海藻糖;成本低,亮度高
长时程/活体成像:CY5.5/CY7-海藻糖;近红外光穿透性强
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)