CY3-Biotin的使用注意事项
避光!Cy3 易光漂白,所有操作步骤(溶解、反应、纯化、储存)都需严格避光。
无水 DMSO:溶解冻干粉时务必使用高质量无水 DMSO,水分会使活化酯(NHS ester)水解失效。溶解后尽快使用。
无胺缓冲液: 标记反应缓冲液绝对不能含有游离伯胺(如 Tris, Glycine, Ammonia, Azide)。使用前务必确认缓冲液成分。
优化摩尔比: 最佳标记比例因目标分子而异,强烈建议进行小规模预实验优化。过度标记有害。
纯化: 未去除的游离 CY3-Biotin 会产生极高的背景噪音,严重影响后续实验(成像背景高、亲和素结合非特异)。纯化步骤必不可少。

pH控制: 反应 pH 对标记效率有用,注意调整至适宜的PH值。
温度与时间: 低温反应更温和但慢;室温反应快但需控制时间防止过度标记。
生物素干扰: 标记物本身带有生物素,在后续使用链霉亲和素系统时,不需要再额外添加生物素化的二抗或探针。
蛋白稳定性: 标记过程可能影响某些蛋白质的结构和功能,标记后需检测活性。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)