CY5-NH2常见科研问答
问:CY5-NH2和 CY5 NHS酯的区别?
答:
-CY5-NH2:含游离氨基(-NH2),需通过偶联反应(如EDC/NHS活化羧基)标记带羧基(-COOH)的目标分子。
-CY5 NHS酯:氨基反应基团已活化,可直接与目标分子的伯氨基(-NH2)反应,操作更简单,适合标记蛋白质、多肽等。
建议:若目标分子含羧基,选CY5-NH2;若含氨基,优先选CY5 NHS酯。
问:标记产物如何保存?
答:-短期:4℃避光保存(1周内使用);
-长期:分装后-20℃冻存(避免反复冻融),加50%甘油可减少冰晶损伤。
问:信号弱或无信号?
答:排查步骤:
1.验证仪器:检查激光器/滤光片是否匹配(激发≈640 nm,发射≥670 nm);
2.测试染料活性:将CY5-NH2滴在滤纸上紫外照射,应显亮蓝色荧光;
3.检查标记率:标记率<1可能信号不足;
4.光漂白:减少曝光时间,加抗淬灭剂。
问:能否与CY3/CY7做多色成像?
答:光谱兼容性:
CY3:激发发射550nm/570nm;推荐滤光片组合TRITC/CY3通道
CY5:激发发射640nm/670nm;推荐滤光片组合Cy5/Cy5.5通道
CY7:激发发射750nm/780;推荐滤光片组合ICG/CY7通道(避免串扰)
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)