FITC-溶菌酶由异硫氰酸荧光素(FITC)和溶菌酶通过化学偶联合成。溶菌酶是一种存在于动物组织、体液(如眼泪、唾液、蛋清)中的碱性蛋白酶,其分子表面含氨基(-NH2)、羧基(-COOH)等活性基团,为 FITC 的偶联提供了可反应的位点。FITC 是经典的绿色荧光染料,最大激发波长约 488nm,最大发射波长约 520nm,在激发光照射下能发出明亮的绿色荧光。
细胞内吞与转运机制:FITC-溶菌酶可用于研究细胞的内吞作用和物质转运过程。通过荧光成像,观察细胞对溶菌酶的摄取方式,以及溶菌酶在细胞内从内体到溶酶体等细胞器的转运路径,揭示细胞物质运输的调控机制。
生物材料相容性研究:在组织工程领域,将 FITC-溶菌酶引入生物材料中,通过荧光检测评估材料与细胞、组织的相互作用,研究材料对细胞黏附、增殖和分化的影响,为开发具有良好生物相容性和功能的组织工程材料提供参考。
使用方法与注意事项
使用方法:根据实验需求,将 FITC-溶菌酶溶解于适宜的细胞培养液中,配制成工作浓度溶液。溶解时可轻轻搅拌或超声处理(避免剧烈超声导致蛋白变性),确保溶液均匀稳定,现用现配。
储存条件:FITC-溶菌酶应储存于-20℃、避光、干燥环境中,避免反复冻融,防止分子结构破坏和荧光性能降低。
实验对照设置:使用 FITC-溶菌酶进行实验时,务必设置合适对照实验,包括阴性对照(不添加 FITC-溶菌酶的实验组)、阳性对照(已知结果的实验组),通过对比分析,准确判断实验结果是否由 FITC-溶菌酶作用引起,排除其他因素干扰。
操作环境:操作时尽量在避光条件下进行,减少光照对 FITC 荧光性能的影响。保持操作环境清洁,防止杂质污染样品,影响实验结果准确性。同时,由于 FITC-溶菌酶溶解于有机溶剂,操作时应在通风橱中进行,避免有机溶剂挥发对人体造成危害。
【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)