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Sulfo-CY5 NHS科研应用方向?常见问题解答

时间:2025-07-21    阅读:205    点赞:0

Sulfo-CY5 NHS 是一种水溶性、近红外荧光标记试剂,应用于生物分子标记(如蛋白质、抗体、多肽、核酸等),用于体外检测、活体成像、流式细胞术、显微成像等多种生物医学研究领域


科研用途(为什么用?)

活体成像

利用近红外光穿透组织的能力,实时追踪:

肿瘤靶向药物分布

干细胞体内迁移

抗体/纳米颗粒的体内药代动力学

 

多色荧光检测

与绿色(FITC)、红色(CY3)染料联用,同时检测多个靶标:

流式细胞术(多参数分析免疫细胞亚群)

免疫荧光/共聚焦显微镜(多蛋白共定位)

 

蛋白质/抗体标记

标记抗体用于:

Western Blot(替代传统HRP显色,灵敏度更高)

免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)

ELISA检测(直接荧光读数)

 

核酸标记

标记DNA/RNA探针,用于:

荧光原位杂交(FISH)

基因芯片检测

 

纳米载体/药物递送研究

标记脂质体、聚合物纳米粒等,追踪其在细胞和活体内的递送效率。

Sulfo-Cy5 NHS 

常见问题解答

问: Sulfo-CY5和普通CY5有什么区别?

答:Sulfo-CY5具磺酸基团,水溶性更好,标记时不易沉淀,更适合标记亲水性大分子(如抗体);普通CY5需用DMSO溶解,易引发蛋白聚集。

 

问: 能否标记不含伯氨基的分子?

答:可改用其他反应基团的衍生物:

巯基(-SH):选Sulfo-CY5 Maleimide(马来酰亚胺)

羧基(-COOH):需先活化羧基,再与Sulfo-CY5 Hydrazide(酰肼)反应

 

问:如何保存?

答:未开封粉末:-20°C 避光干燥保存,保质期 ≥1 年。

溶解后:用无水 DMSO 配制母液,建议现用现配,避免溶解后存储。

 

问:关键注意事项

答:避光操作:全程用铝箔包裹样品,防止荧光淬灭。

无水环境:NHS 酯易水解,母液需无水 DMSO 配制,避免接触水汽。

pH 控制:标记反应 pH 需 ≥8.0(最佳 pH 8.5-9.0),低 pH 降低反应效率。

避免胺类缓冲液:PBS 可用,但不可含 Tris、甘氨酸、NaN₃、铵盐(会竞争结合染料)。

优化染料比例:过高标记导致蛋白聚集或失活,建议梯度测试。

标记后的样品:4℃短期保存,长期需加甘油(50%)存于-20°C。

 

问:能否用于细胞标记?

答:可标记细胞表面蛋白(需先纯化蛋白再与细胞孵育),但 不可直接穿透细胞膜。活细胞内标记需显微注射或电转递送,或使用细胞穿透肽(CPP)融合蛋白。

 

【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)

 

标签: CY5 NHS 花菁染料
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