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星戈瑞,CY5-NHS ester产品常见使用问答

时间:2025-05-30    阅读:269    点赞:0

CY5-NHS ester产品使用中的常见问题解答(仅参考):

产品相关介绍:(点击进入)CY5-NHS产品详情

1、如何保存CY5-NHS ester?

答:

温度:避光保存在-20°C (干燥环境)。

固体粉末:在干燥避光条件下可稳定保存 ≥2 年。

溶解后:建议立即使用,避免反复冻融。

防潮防光:使用干燥剂密封保存,操作时避光。

 

2、标记后荧光信号弱怎么办?

答:可能原因与对策:

染料水解失效:使用新鲜配制的染料母液

标记比例过低:增加染料投料比(优化至 10:1)

纯化过程损失:缩短纯化时间,避免过度透析

缓冲液含干扰物:确保缓冲液无氨基、硫醇基

激发/发射波长错误:校准仪器参数(CY5需红光激光器)

Cy5-NHS 

3、CY5-NHS ester能否标记核酸?

答:

不建议直接标记:NHS酯靶向氨基,而核酸缺乏伯氨基。

可间接标记:合成带氨基修饰的寡核苷酸(如 5'-Amine modifier)。

将CY5-NHS酯与该氨基修饰的核酸反应。

 

4、标记后蛋白沉淀/聚集如何解决?  

答:  

原因:染料过量、疏水性增强或缓冲液不当  

挽救步骤:  

  1. 降低染料/蛋白比(如2:1)重新标记  

  2. 添加 5-10%甘油或0.1% BSA 减少疏水作用  

  3. 置换缓冲液为 PBS + 0.05% Tween-20(非离子表面活性剂)  

 

 

5、CY5-NHS与Sulfo-CY5-NHS对比

水溶性:

CY5-NHS低(需有机溶剂);Sulfo-CY5-NHS高(可直接水溶)

细胞穿透性:

CY5-NHS强(适细胞内膜标记);Sulfo-CY5-NHS弱(限于细胞表面)

电荷影响:

CY5-NHS中性(不易干扰靶点);Sulfo-CY5-NHS带负电(可能影响互作)。

 

【星戈瑞stargraydye】以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证, 仅供参考!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)

标签: NHS CY5 星戈瑞
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