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BODIPY-HRP,硼二吡咯亚甲基标记辣根过氧化物酶产品科普

时间:2026-09-08    阅读:2    点赞:0

一、材料概述

BODIPY-HRP将BODIPY荧光团与辣根过氧化物酶连接,可同时提供荧光示踪信息和酶蛋白相关特征。偶联后是否保留足够酶活以及游离染料是否去除,是质量评价的重要环节。 制备流程通常包括HRP原料缓冲置换、活性BODIPY试剂按比例反应、终止或封闭残余活性基团、凝胶过滤/透析等方式去除游离染料,随后进行蛋白浓度、标记度、光谱和酶活检测。使用时应避免强光和不合适的氧化还原环境,并根据实验目的决定主要读取荧光信号还是酶催化信号。两种读出并存并不意味着所有条件都能同时兼容,需要分别优化。

二、基础信息与物理化学性质

中文名称

BODIPY标记辣根过氧化物酶

英文名称

BODIPY-HRP

别称

BODIPY-conjugated Horseradish Peroxidase、硼二吡咯亚甲基-HRP

材料类型

荧光标记酶偶联物

性状

有色冻干粉或溶液,具体以批次和包装形式为准

溶解性

通常可在与蛋白活性兼容的水相缓冲液中复溶;实际溶解条件以产品说明和预实验为准

储存

建议低温、避光保存;复溶后分装,减少反复冻融

纯度

以具体批次质检报告或产品说明为准;偶联类材料还应结合游离染料残留、标记度或蛋白活性综合评价

保质期

以产品标签和批次说明为准,开封或复溶后的稳定性受保存条件影响

运输条件

依据材料形态与季节采用常温或低温避光运输,具体以发货要求为准

供应商

星戈瑞

应用方向

荧光示踪、成像、材料表征、结合/摄取研究或相关体外科研检测;具体用途需结合材料属性确定

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三、产品科普与全流程

核心组分解析

辣根过氧化物酶 (HRP):HRP是一种从辣根中提取的酶,分子量约为40-44 kDa,是一种稳定的糖蛋白。在免疫学实验中,它常被用作标记物,能催化底物产生可检测的信号。 

BODIPY (硼二吡咯亚甲基) 染料:这是一类性能优异的荧光染料。

核心优势:相较于传统的荧光素(如FITC)等染料,BODIPY具有极高的光稳定性、狭窄的发射光谱(信号更纯净)和高摩尔消光系数(吸收光能力强)。

光谱可调:通过化学修饰,BODIPY的荧光发射波长可以从绿色(约500 nm)覆盖到近红外区域(>750 nm),为多色成像提供了便利。

关键特性与优势

双重功能:结合了HRP的酶学活性(强大的信号放大能力)和BODIPY的荧光特性(可直接观察)。

高灵敏度:在免疫检测中,BODIPY-HRP相比直接标记的二抗具有更强的信号放大能力。

高稳定性:BODIPY染料的光稳定性保证了在长时间、高强度光照下,荧光信号依然稳定,适合进行延时成像等实验。

低背景干扰:BODIPY染料通常为电中性、非极性,这有助于减少其与生物分子的非特异性结合,从而降低实验背景。

 主要应用领域

免疫检测:作为核心示踪试剂,用于ELISA、Western blot和免疫组化(IHC) 等实验。

细胞成像:用于研究酶的亚细胞定位、转运途径及与底物的动态相互作用。

信号放大(TSA技术):在酪胺信号放大(TSA)技术中,BODIPY-HRP可催化BODIPY标记的酪胺底物沉积,实现对低丰度靶标的高灵敏度检测。

活体示踪:近红外区域的BODIPY-HRP可用于追踪酶在肿瘤微环境或炎症组织中的分布。

产品形式与存储

市售的BODIPY-HRP通常为固体或粘性液体,纯度可达95%-98%。为保证活性,产品一般要求在 -20°C 条件下避光、避湿保存。

四、相关材料

从原料到制剂涉及的所有产品

‌起始原料‌:辣根粗提物、BODIPY母核荧光染料、过氧化氢、3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)

‌纯化试剂‌:离子交换层析填料、凝胶过滤层析介质、硫酸铵沉淀试剂

‌标记反应试剂‌:EDC/NHS活化体系、pH 7.4 PBS偶联缓冲液、无水DMSO助溶剂

‌质控检测试剂‌:BCA蛋白定量试剂盒、紫外-可见分光光度计、荧光光谱仪、酶标活性检测试剂盒

‌下游制剂‌:BODIPY-HRP免疫检测工作液、BODIPY-HRP TSA成像试剂盒、BODIPY-HRP荧光传感探针

‌配套耗材‌:Western Blot发光底物液、共聚焦成像专用细胞培养皿、微流控免疫分析芯片

 

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境) 


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