中文名称 ICG-L-脯氨酸
英文名称 ICG-L-Proline
别称 ICG-Proline;吲哚菁绿标记L-脯氨酸
ICG-L-Proline由近红外染料ICG与L-脯氨酸构建而成,适合在需要近红外信号读出的科研体系中作为示踪材料。其研究重点不仅是是否完成偶联,还包括游离染料去除、光谱保持以及储存过程中信号稳定性。 研究可按“结构确认—溶液条件筛选—光谱表征—体系适配—结果复核”展开。先利用质谱、色谱等手段确认目标组分,再比较水相或含少量有机助溶剂体系中的分散状态;随后记录吸收与发射变化,并通过浓度梯度确定检测区间。进入细胞或体外模型前,应设置未标记脯氨酸和ICG对照,避免把游离染料信号误判为偶联物行为。
基础信息与物理化学性质
中文名称 |
吲哚菁绿标记L-脯氨酸 |
英文名称 |
ICG-L-Proline |
别称 |
ICG-L-脯氨酸、Indocyanine Green-L-Proline |
材料类型 |
近红外染料-氨基酸偶联物 |
性状 |
有色固体或粉末,具体色泽受染料结构和含量影响 |
溶解性 |
可根据结构选择水相缓冲液或适量有机助溶体系,使用前建议做小量溶解测试 |
储存 |
密封、避光、干燥、低温保存,复溶液尽量现配现用或分装保存 |
纯度 |
以具体批次质检报告或产品说明为准;偶联类材料还应结合游离染料残留、标记度或蛋白活性综合评价 |
保质期 |
以产品标签和批次说明为准,开封或复溶后的稳定性受保存条件影响 |
运输条件 |
依据材料形态与季节采用常温或低温避光运输,具体以发货要求为准 |
供应商 |
星戈瑞 |
应用方向 |
荧光示踪、成像、材料表征、结合/摄取研究或相关体外科研检测;具体用途需结合材料属性确定 |
研究步骤
ICG-L-Proline是将近红外荧光染料吲哚菁绿(ICG)与L-脯氨酸偶联的荧光标记物。ICG是一种三碳菁类化合物,具有激发波长范围宽、斯托克斯位移大、光稳定性好、与蛋白质结合后不易被蛋白酶水解等优点。基于ICG标记蛋白质的通用流程,其研究步骤如下:
步骤一:目的蛋白/氨基酸的制备
根据实验需要,通过细胞培养、蛋白质抽提或化学合成等方法获得待标记的L-脯氨酸或含脯氨酸的目标蛋白。L-脯氨酸的工业生产主要有化学合成法、天然蛋白质水解液提取法以及直接发酵法。
步骤二:ICG染料溶液的制备
将所需用量的ICG染料溶于pH 7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中,配制成适当浓度(如100 μM)的储备溶液。部分ICG衍生物(如NHS ester形式)需先用无水DMSO溶解制备10-20 mM储备溶液。
步骤三:标记反应
将目的蛋白/氨基酸与ICG溶液混合,在适当条件下反应。ICG与蛋白质的摩尔比通常在5:1到20:1之间。反应需在适宜缓冲液(如pH 7.2-7.4的PBS)中进行。
步骤四:分离纯化
通过PAGE电泳或色谱等方法将标记产物与未反应的游离染料分离。例如制备10%分离胶进行电泳,染色后观察目的蛋白是否被成功标记。收集含绿色偶联物的组分。
步骤五:分析与验证
通过紫外-可见光谱、荧光光谱、质谱或SDS-PAGE等方法鉴定偶联物的标记率和纯度。用荧光扫描仪检测荧光信号强度,也可利用分析软件对条带进行定量分析。实验过程中需严格控制温度、pH等反应条件,避免荧光淬灭剂污染。
相关材料与可延伸研究
ICG-NHS、ICG-COOH、ICG-氨基酸系列,可按研究需要提供不同包装量或连接方式。 星戈瑞可围绕同类荧光染料、不同连接臂、不同分子量或不同标记形式提供科研材料信息。实际选型时,应根据实验平台、检测波段、样品体系和后续纯化方式确定规格,并在下单或实验前核对结构、包装量及批次参数。
实验与保存注意事项
数据解释时需要注意,荧光强度变化可能来自浓度变化、环境极性、聚集、淬灭、光漂白或仪器设置,而不一定直接代表目标分子的含量变化。建议采用空白组、未标记材料组、游离染料组以及必要的竞争或阻断组进行交叉验证。 建议所有荧光材料全程尽量避光操作,复溶后按单次用量分装。若观察到颜色、溶解状态、光谱或活性出现明显变化,应暂停直接用于关键实验并先进行状态复核。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)