一、材料信息
中文名称:Cy5标记表皮生长因子
英文名称:Cy5-labeled Epidermal Growth Factor
别称:Cy5-EGF、花菁5标记EGF
性状:常见为蓝紫色冻干物或溶液。蛋白浓度较低时易受容器吸附影响,宜使用适配缓冲液并低温、避光、分装保存。
溶解性:与母体材料、标记度、连接臂、盐型及缓冲体系有关,建议依据批次说明进行小体积预溶解测试。
储存:建议低温、避光、密封保存;蛋白类产品复溶后宜分装,减少反复冻融。具体温度以产品标签或批次说明为准。
纯度:可按项目需求提供相应纯化与质控资料,具体数值以批次检测报告为准。
保质期:以产品标签及批次说明为准。
运输条件:根据产品形态与稳定性安排常温、冰袋或干冰运输,具体以发货说明为准。
供应商:西安星戈瑞
应用方向:荧光示踪、材料表征、结合分析、细胞或组织成像、检测方法开发等科研方向。
二、材料介绍与物理化学性质
EGF是小分子蛋白配体。Cy5标记后可用于受体结合、内吞过程、细胞表面定位及荧光成像方法研究。标记设计需控制染料与蛋白比例,避免过度修饰影响蛋白构象。
常见为蓝紫色冻干物或溶液。蛋白浓度较低时易受容器吸附影响,宜使用适配缓冲液并低温、避光、分装保存。
荧光偶联会改变母体材料的局部电荷、疏水性和分子量,因此标记物与未标记原料在溶解、吸附、迁移和结合表现上可能存在差异。对于多糖和蛋白类材料,产品通常是具有一定平均标记度的混合偶联体系;对于小分子探针,则需关注连接位点、连接臂以及是否存在异构体。实际实验参数应以批次资料和预实验结果为依据。
三、新品上市
在产品选型时,建议把“可检测性、蛋白状态和批次信息”作为主要核对项。应确认荧光团类型、标记度或染料/蛋白比、蛋白浓度、缓冲液组成、纯化方式及推荐保存条件。对于需要流式或显微检测的实验,还应提前核对仪器激光线和滤光片范围,并用小规模预实验确定工作浓度。
在检测环节,建议先确认仪器激发光源、滤光片或检测器与荧光团的光谱范围相匹配,再通过浓度梯度确定信号区间。样品中若存在自发荧光、蛋白吸附或颗粒散射,应增加空白体系和未标记材料对照。数据记录中可同时保留原始荧光强度、背景扣除方式、曝光或增益参数,以便不同批次实验之间进行核对。
四、新品核心升级亮点
高活性位点特异性偶联:采用优化的伯胺定向偶联工艺,染料接枝位点精准避开EGF的受体结合活性区域,偶联完成后EGF的生物活性保留率≥95%,远高于传统随机偶联工艺的活性水平,不会出现标记后EGF促增殖、受体结合能力大幅下降的问题。
近红外成像性能拉满:Cy5的特征激发波长649nm、发射波长670nm,处于生物组织近红外透光窗口,生物自发荧光干扰极低,信噪比>50:1,荧光量子产率达0.28,亮度是传统可见光荧光标记EGF产品的1.5~2倍,连续强光照射1小时荧光保留率仍>80%,光稳定性大幅提升。
超低游离染料残留:经过多步SEC-HPLC纯化工艺处理,游离Cy5染料残留率<0.5%,完全避免游离染料带来的非特异性背景干扰,细胞成像时胞内本底信号仅200AU,信噪比可达17.5:1,成像清晰度远超同类型普通产品。
适配多场景实验需求:产品提供2-10个碳链长度的可选连接臂,可根据实验体系灵活选择,减少荧光基团对EGF空间构象的干扰,适配不同分子量体系的标记与成像需求。
五、实测性能验证数据
标记效率:1mg/mL EGF与10倍摩尔比Cy5-伯胺在37℃反应2小时,标记率可达92%,无游离染料残留,EGF与EGFR的结合活性和未标记天然EGF无显著差异。
细胞成像表现:Cy5标记的EGF与A431高表达EGFR细胞孵育30分钟,共聚焦成像显示荧光信号高度富集于细胞膜,平均荧光强度达3500AU,可清晰追踪探针从细胞膜内吞到细胞器定位的完整动态过程,时间分辨率可达秒级。
活体成像表现:Cy5-EGF经尾静脉注射荷瘤小鼠6小时后,肿瘤部位荧光强度是正常组织的8.3倍,成像深度可达1cm,可清晰区分肿瘤边界,精准观测EGFR高表达肿瘤的靶向富集过程。
六、从原料到制剂涉及的全链路产品
上游原料(标记合成基础物料)
重组人表皮生长因子 EGF(冻干多肽原料)
Cy5NHS Ester,Cy5 活性酯染料原料
SulfoCy5NHS Ester,水溶性磺化 Cy5 活性酯
缓冲试剂:碳酸氢钠、PBS 粉末、HEPES;透析袋、凝胶过滤填料等纯化耗材
中间偶联产物及对照品
游离 Cy5 染料,实验对照使用
未标记 EGF 多肽,阴性对照样品
不同 DOL 偶联比例 Cy5EGF 梯度样品
成品制剂形式
Cy5EGF 冻干粉,标准科研剂型
Cy5EGF 无菌缓冲液,液体分装,80℃避光储存
EGF 固相微球Cy5:Cy5 标记 EGF 偶联固相微球,用于受体亲和捕获实验
配套定制服务
星戈瑞支持 EGF 及其他细胞因子、多肽的荧光标记定制,可调整染料种类、染料多肽偶联 DOL 比值,可选择冻干、液体不同制剂形式,配套 UVVis 光谱、HPLC 表征,出具 COA 文件,适配不同科研实验需求。