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Cy3.5-半乳糖苷酶(Cy3.5-β-Galactosidase)工作原理解析

时间:2026-08-31    阅读:11    点赞:0

中文名称:Cy3.5标记β-半乳糖苷酶、花青素Cy3.5标记β-半乳糖苷酶

英文名称:Cy3.5-β-GalactosidaseCy3.5-labeled β-galactosidase

别称:Cy3.5-β-gal

 

一、材料背景

β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,简称β-gal)是一种水解酶,其生理功能是催化水解糖苷键,将乳糖转化为半乳糖和葡萄糖。在分子生物学研究中,β-半乳糖苷酶常作为报告酶用于研究基因调控、蛋白-蛋白相互作用以及细胞融合等实验。

Cy3.5Cyanine 3.5)是一种发红色荧光的花青素类荧光染料,其荧光激发峰和发射峰分别在590 nm605 nm左右。根据水溶性不同,Cy3.5可分为普通Cy3.5和磺化Cy3.5Sulfo-Cy3.5)。Cy3.5染料可用于标记蛋白、抗体、多肽及核酸分子等生物大分子。

Cy3.5-β-Galactosidase是将Cy3.5荧光染料与β-半乳糖苷酶通过共价偶联制备而成的荧光标记酶。该材料将Cy3.5的红色荧光特性与β-半乳糖苷酶的酶学功能相结合,在酶活性检测和细胞成像等领域有应用。

 

二、产品基本信息

性状:固体/粉末或溶液状态

储存条件:冷藏保存

纯度:98%

保质期:1

供应商:西安星戈瑞(Stargray)提供Cy系列荧光染料及相关荧光标记蛋白、多肽等产品的定制服务

温馨提示:本产品仅供科研使用,不能用于人体实验

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三、工作原理

Cy3.5-β-Galactosidase的工作原理可从荧光标记机制和酶学检测机制两个层面进行解析。

 荧光标记机制方面,Cy3.5染料的标记依赖于其分子上的活性基团与β-半乳糖苷酶分子表面的官能团发生共价偶联反应。常用的标记方式包括:Cy3.5 NHS酯与蛋白N末端或赖氨酸侧链的伯胺基团在弱碱性条件下(pH 8.3–8.5)反应,形成稳定的酰胺键;或使用Cy3.5马来酰亚胺与半胱氨酸残基的游离巯基在中性pH条件下反应,形成稳定的硫醚键。标记完成后,通过透析或凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,得到纯化的Cy3.5-β-Galactosidase

 酶学检测机制方面,β-半乳糖苷酶能够催化含β-半乳糖苷键底物的水解反应。在常规检测中,β-半乳糖苷酶可作用于显色底物(如X-gal)或化学发光底物(如Galacton系列),产生可检测的比色或化学发光信号。Cy3.5-β-Galactosidase将荧光信号直接连接于酶分子本身,使得酶分子的分布和定位可通过荧光显微镜直接观测,而无需额外加入显色或发光底物。Cy3.5染料的激发波长约581–591 nm,发射波长约596–604 nm,常用激光线为555 nm561 nm,可与TRITC滤光片组配合使用。

 

四、相关产品

围绕Cy3.5-β-Galactosidase,市场上可提供多种相关产品:

1. 其他荧光染料标记的β-半乳糖苷酶

Cy3.5外,β-半乳糖苷酶还可与多种荧光染料偶联,包括Cy3-β-GalactosidaseCy5-β-GalactosidaseCy7.5-β-GalactosidaseFITC-β-Galactosidase等。不同荧光标记的产品可根据实验的多色标记需求进行选择。

2. Cy3.5活化荧光染料

用于自行标记β-半乳糖苷酶的活化染料,包括Cy3.5 NHS酯(标记氨基)、Cy3.5马来酰亚胺(标记巯基)、Cy3.5叠氮/Cy3.5炔烃(点击化学标记)等。

3. 磺化Cy3.5标记产品

磺化Cy3.5Sulfo-Cy3.5)具有更好的水溶性,标记后不易引发蛋白疏水性聚集,标记产物稳定性更高。星戈瑞可提供磺化Cy系列染料,包括sulfo-Cy3.5等。

4. β-半乳糖苷酶活性检测相关试剂

包括显色底物(X-gal)、化学发光底物以及各类β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒。

 

以上相关产品由西安星戈瑞等供应商提供,可根据科研项目需求开展不同荧光染料、连接方式及标记比例的定制开发。

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