中文名称:AF488标记的重组蛋白A、AF488-蛋白A、Alexa Fluor 488偶联重组蛋白A
英文名称:AF488-Protein A、AF488-Recombinant Protein A、Alexa Fluor 488 conjugated Protein A
别称:AF488荧光标记蛋白A、AF488 recombinant Protein A、AF488-Protein A conjugate
AF488重组蛋白A是将Alexa Fluor 488(AF488)荧光染料与重组蛋白A通过共价偶联制备而成的荧光探针。蛋白A来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)细胞壁,是一种能够特异性结合免疫球蛋白Fc段的细菌表面蛋白。重组蛋白A经基因工程改造,去除了天然蛋白A的细胞壁结合区、细胞膜结合区和白蛋白结合区,保留了五个IgG结合结构域,从而确保了对免疫球蛋白的特异性结合能力。AF488则是一种新型荧光染料,属于荧光素衍生物。
AF488-Protein A将蛋白A的分子识别能力与AF488的荧光示踪能力整合于同一分子体系中,可作为绿色荧光探针用于免疫检测和细胞分析。该产品仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。

物理化学性质
荧光光谱特性:AF488的激发波长约为495 nm,发射波长约为519 nm。这一光谱范围与配备488 nm激光光源的流式细胞仪和共聚焦显微镜兼容性良好。
分子量:AF488-Protein A的分子量约为42-48 kDa。
外观性状:通常为亮黄绿色透明溶液。
溶解性:可溶于水相缓冲液(如PBS,pH 7.2–7.4),在DMSO和DMF中也可良好溶解。AF488是磺化的水溶性荧光染料,无需有机共溶剂即可在水相中进行标记反应。
pH稳定性:AF488染料在pH 4–10范围内荧光强度保持稳定。重组蛋白A的IgG结合活性在pH 7.0–8.5范围内表现良好。
纯度:一般可达95%以上。
储存条件:建议在-20°C以下冰冻、干燥、避光保存。应避免频繁解冻,现配现用。
工作原理
AF488-Protein A的工作原理基于蛋白A-抗体特异性识别与AF488荧光信号输出的结合。蛋白A部分负责识别并结合免疫球蛋白(特别是IgG)的Fc段;AF488部分则提供可被光学设备检测的绿色荧光信号。两者通过化学偶联——AF488的活性衍生物(如NHS酯)与蛋白A分子表面的伯氨基反应形成稳定的共价键。
AF488-Protein A可识别并结合来自多个物种的多种免疫球蛋白,包括人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4,小鼠IgG2a、IgG2b、IgG3,以及大鼠IgG2a、IgG2c等。
主要应用方向包括:
(1)流式细胞术。AF488-Protein A可用于流式细胞术中细胞表面或胞内IgG的检测与分析,适用于检测表达特异性抗体的B细胞、评估抗体药物的细胞结合活性以及免疫细胞分型实验。AF488可被488 nm激光有效激发,其亮度和光稳定性适用于低表达标志物的检测。
(2)免疫荧光(IF)与免疫细胞化学(ICC) 。AF488-Protein A可作为绿色荧光探针,用于对已结合的IgG类抗体进行检测与定位。
(3)Western Blot检测。可作为荧光探针用于转印膜上靶蛋白结合的IgG类一抗的检测。
(4)蛋白相互作用与结合研究。可用于研究蛋白A与免疫球蛋白的结合动力学及蛋白相互作用的空间分布。
星戈瑞可提供的相关产品与规格
星戈瑞(Stargraydye)是一家专注于荧光染料及荧光标记试剂的科研供应商,可提供发射波长范围380–1080 nm之间、具有不同量子产率、颜色及理化性质的荧光染料产品。
在AF488系列产品方面,星戈瑞提供多种AF488功能化衍生物及标记产品,包括:
AF488 NHS酯(AF488活性酯) :用于蛋白质、多肽及含氨基生物分子的荧光标记
AF488-COOH(AF488羧酸) :含羧酸官能团的AF488衍生物
AF488-生物素(AF488-Biotin) :兼具荧光信号与生物素亲和标签的双功能试剂
AF488标记的多种蛋白:包括AF488-laminin(层粘连蛋白)、AF488-EGCG等
星戈瑞同时提供多种荧光标记定制服务,可根据科研人员的具体实验需求进行分子结构与功能的定制开发。具体的AF488-Protein A包装规格、产品浓度及定制化需求可向星戈瑞进一步咨询。
参考文献
Aladdin Scientific. Recombinant Protein A/G, AF488 conjugate
Thermo Fisher. Protein A, Alexa Fluor™ 488 conjugate
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)