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BSA-FITC Fluorescein-BSA 荧光素标记牛血清白蛋白的介绍

时间:2026-05-19    阅读:9    点赞:0

BSA-FITC 介绍

BSA-FITC 是牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)与荧光异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)共价偶联形成的荧光标记蛋白。BSA 是一种天然来源的血清蛋白,分子量约为 66 kDa,具有良好的水溶性、稳定性和生物相容性,广泛用于实验室作为载体蛋白、阻断剂和标准蛋白。FITC 是一种经典的绿色荧光染料,激发波长约为 495 nm,发射波长约为 520 nm,亮度高、量子产率优良,在生物标记和荧光成像中应用广泛。

BSA-FITC 的形成通常通过 FITC 的异硫氰酸基(–N=C=S)与 BSA 中赖氨酸残基的氨基发生共价偶联反应,形成稳定的硫脲键,实现荧光标记。该标记蛋白结合化学性质与结构了 BSA 的天然稳定性与 FITC 的强荧光特性,可在细胞成像、免疫分析和多色荧光实验中提供可靠信号。

BSA 分子中含有丰富的赖氨酸残基和少量半胱氨酸残基,为荧光偶联提供活性位点。FITC 是一种异硫氰酸酯类荧光染料,可与蛋白质中的初级氨基反应,形成稳定的硫脲键。

BSA-FITC 的制备通常步骤如下:

将 BSA 溶解于碳酸盐缓冲液或 PBS(pH 8.0–9.0),为 FITC 偶联提供碱性环境。

将 FITC 溶解于有机溶剂(如 DMSO)后加入 BSA 溶液,反应生成共价结合。

通过透析、凝胶过滤或离心过滤去除未结合的游离 FITC,得到纯净的 BSA-FITC 标记蛋白。

这种共价偶联保证了 FITC 与 BSA 的稳定结合,标记后蛋白在水溶液中稳定,不易聚集或降解,便于长期储存和实验使用。

BSA-FITC

光学特性

BSA-FITC 的光学特性主要由 FITC 决定,其特点如下:

激发波长(λ_ex):约 495 nm

发射波长(λ_em):约 520 nm

高量子产率:提供明亮的绿色荧光信号

光敏性:在强光下可能发生光漂白,但在常规显微镜下可保持稳定信号

适合多色荧光实验:可与红色或远红色荧光染料组合,实现多通道成像

由于 FITC 的绿色荧光特点,BSA-FITC 可在荧光显微镜、流式细胞仪、免疫荧光分析等实验中提供清晰的信号。

主要应用

细胞成像与荧光追踪
BSA-FITC 可作为示踪蛋白,用于标记细胞膜、细胞器或特定蛋白,观察细胞摄取、内吞作用、迁移及分布。

免疫分析
BSA-FITC 可作为抗原或抗体的标记蛋白,用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)以及流式细胞术(FACS),提供高灵敏度检测。

多色荧光实验
FITC 的绿色荧光可与红色或远红色荧光染料组合,实现多通道共定位分析和多色成像,提高实验信息量。

蛋白追踪与药物递送研究
BSA-FITC 可用于标记药物载体、纳米颗粒或水凝胶,通过荧光信号追踪在体内外的分布、降解及释放情况。

材料科学研究
BSA-FITC 可用于标记生物材料,评估其分布、稳定性和降解情况,为材料研究提供可视化工具。

使用注意事项

溶解性与缓冲液选择
BSA-FITC 可溶于 PBS 或碳酸盐缓冲液,避免强酸、强碱或高盐条件,以免影响蛋白结构和荧光性能。

避光操作
FITC 对光敏感,长时间暴露于强光下可能导致光漂白,应在避光条件下操作和存储。

储存条件
BSA-FITC 建议在 -20°C 避光保存,溶液短期可在 4°C 避光保存,避免反复冻融。

实验浓度优化
在细胞成像或免疫实验中,应根据实验设计优化 BSA-FITC 浓度,避免非特异性信号增加。

生物相容性
BSA-FITC 保留 BSA 的天然生物相容性,但在高浓度下或体内使用仍需注意可能的免疫反应。

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境) 


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