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ATTO 488 NHS ester的光学特性

时间:2026-05-19    阅读:6    点赞:0

ATTO 488 NHS Ester 介绍

ATTO 488 NHS Ester 是 一种高性能绿色荧光染料,属于 ATTO 系列荧光标记试剂。其主要特点是高亮度、出色的光稳定性以及低光漂白性,使其成为蛋白质标记、抗体标记和多色荧光实验中理想的工具。ATTO 488 NHS Ester 的 NHS 酯(N-hydroxysuccinimide ester)活性基团能够与含有初级氨基的生物分子形成稳定的共价结合,从而实现高效的荧光标记。该染料的激发波长约为 501 nm,发射波长约为 523 nm,因此在绿色荧光通道中具有显著的检测优势。

化学性质与结构

ATTO 488 是一种改良的荧光染料,分子结构稳定,能够提供高量子产率和亮度。NHS 酯形式的 ATTO 488 末端带有活性酯基,可在碱性条件下与蛋白质、抗体或其他含氨基的分子共价偶联,形成稳固的酰胺键。与 carboxylic acid 或其他活化形式的荧光染料相比,NHS 酯形式具有偶联速度快、反应条件温和的优点。

ATTO 488 的分子结构经过优化,抗光漂白性能优异,即便在长时间激发下,其荧光信号衰减速度也远低于传统的 FITC 染料,这对于长时间观察实验、共聚焦显微镜成像及流式细胞术(FACS)实验尤其重要。

ATTO 488 NHS Ester

光学特性

ATTO 488 NHS Ester 属于绿色荧光染料,主要光学参数如下:

激发波长(λ_ex):约 501 nm

发射波长(λ_em):约 523 nm

高量子产率:提供强烈荧光信号

光稳定性高:抗光漂白能力远高于 FITC

可在水溶液和缓冲液中稳定存在

这些特性使 ATTO 488 在多色荧光实验中非常实用,可与红色或远红色荧光染料(如 ATTO 647N、Alexa Fluor 647 等)联合使用,实现多通道检测,而不会产生明显的光谱重叠。

主要应用

蛋白质标记
ATTO 488 NHS Ester 可以与蛋白质中的赖氨酸残基反应,形成稳定的共价结合,从而实现抗体、酶或受体蛋白的荧光标记。该标记可用于定量分析、蛋白质定位研究以及功能检测。

抗体偶联
适用于一级或二级抗体标记,广泛应用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)以及流式细胞术(FACS)实验。标记后的抗体具有高灵敏度检测能力,并可与其他荧光染料组合进行多色成像。

细胞和组织成像
ATTO 488 NHS Ester 可用于标记细胞膜、细胞器或特定蛋白,从而在荧光显微镜或共聚焦显微镜下清晰观察细胞结构和动态过程。

分子相互作用研究
可用于 FRET(荧光共振能量转移)实验,作为供体荧光染料研究蛋白质-蛋白质或蛋白质-核酸相互作用。

多色荧光实验
与红色或远红色荧光染料联合使用,ATTO 488 可以在绿色通道提供清晰信号,适合多通道共定位分析或细胞标记实验。

使用注意事项

溶解性
ATTO 488 NHS Ester 为固体粉末,可溶于 DMSO 或 DMF 等有机溶剂,溶解后用于缓冲液中的偶联实验。避免直接溶于水中,以防 NHS 酯水解。

偶联条件
偶联反应通常在碱性缓冲液(pH 7.2–8.5)中进行,反应时间和染料与蛋白摩尔比需根据实验需求优化。

储存条件
干粉应避光、低温(-20°C)干燥保存。溶液短期可在 4°C 避光保存,长期保存会影响荧光强度和偶联活性。

以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境) 


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