ATTO 488 NHS Ester 介绍
ATTO 488 NHS Ester 是 一种高性能绿色荧光染料,属于 ATTO 系列荧光标记试剂。其主要特点是高亮度、出色的光稳定性以及低光漂白性,使其成为蛋白质标记、抗体标记和多色荧光实验中理想的工具。ATTO 488 NHS Ester 的 NHS 酯(N-hydroxysuccinimide ester)活性基团能够与含有初级氨基的生物分子形成稳定的共价结合,从而实现高效的荧光标记。该染料的激发波长约为 501 nm,发射波长约为 523 nm,因此在绿色荧光通道中具有显著的检测优势。
化学性质与结构
ATTO 488 是一种改良的荧光染料,分子结构稳定,能够提供高量子产率和亮度。NHS 酯形式的 ATTO 488 末端带有活性酯基,可在碱性条件下与蛋白质、抗体或其他含氨基的分子共价偶联,形成稳固的酰胺键。与 carboxylic acid 或其他活化形式的荧光染料相比,NHS 酯形式具有偶联速度快、反应条件温和的优点。
ATTO 488 的分子结构经过优化,抗光漂白性能优异,即便在长时间激发下,其荧光信号衰减速度也远低于传统的 FITC 染料,这对于长时间观察实验、共聚焦显微镜成像及流式细胞术(FACS)实验尤其重要。

光学特性
ATTO 488 NHS Ester 属于绿色荧光染料,主要光学参数如下:
激发波长(λ_ex):约 501 nm
发射波长(λ_em):约 523 nm
高量子产率:提供强烈荧光信号
光稳定性高:抗光漂白能力远高于 FITC
可在水溶液和缓冲液中稳定存在
这些特性使 ATTO 488 在多色荧光实验中非常实用,可与红色或远红色荧光染料(如 ATTO 647N、Alexa Fluor 647 等)联合使用,实现多通道检测,而不会产生明显的光谱重叠。
主要应用
蛋白质标记
ATTO 488 NHS Ester 可以与蛋白质中的赖氨酸残基反应,形成稳定的共价结合,从而实现抗体、酶或受体蛋白的荧光标记。该标记可用于定量分析、蛋白质定位研究以及功能检测。
抗体偶联
适用于一级或二级抗体标记,广泛应用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)以及流式细胞术(FACS)实验。标记后的抗体具有高灵敏度检测能力,并可与其他荧光染料组合进行多色成像。
细胞和组织成像
ATTO 488 NHS Ester 可用于标记细胞膜、细胞器或特定蛋白,从而在荧光显微镜或共聚焦显微镜下清晰观察细胞结构和动态过程。
分子相互作用研究
可用于 FRET(荧光共振能量转移)实验,作为供体荧光染料研究蛋白质-蛋白质或蛋白质-核酸相互作用。
多色荧光实验
与红色或远红色荧光染料联合使用,ATTO 488 可以在绿色通道提供清晰信号,适合多通道共定位分析或细胞标记实验。
使用注意事项
溶解性
ATTO 488 NHS Ester 为固体粉末,可溶于 DMSO 或 DMF 等有机溶剂,溶解后用于缓冲液中的偶联实验。避免直接溶于水中,以防 NHS 酯水解。
偶联条件
偶联反应通常在碱性缓冲液(pH 7.2–8.5)中进行,反应时间和染料与蛋白摩尔比需根据实验需求优化。
储存条件
干粉应避光、低温(-20°C)干燥保存。溶液短期可在 4°C 避光保存,长期保存会影响荧光强度和偶联活性。
以上数据均来自文献/科研资料,星戈瑞暂未进行独立验证,限参考。我方仅提供相关产品,不参与保证任何实验,具体应用还需参考相关实验设计及文章!(以上文中所述仅限于科研实验及实验室环境)