水溶性-CY5-马来酰亚胺简介
水溶性-CY5-马来酰亚胺(Sulfo-CY5-MAL)是一种高性能荧光染料衍生物,由红外荧光染料CY5与马来酰亚胺(Maleimide)基团共价结合而成,并通过磺酸基提高水溶性。CY5染料属于花青素类红光荧光染料,具有发射波长约在670 nm的近红外区域,光稳定性高、量子产率良好、背景低。马来酰亚胺基团是一种专门与巯基(–SH)反应的活性官能团,可高效、选择性地与蛋白质或小分子中的半胱氨酸残基形成稳定的硫醚键。磺酸基(Sulfo)的引入不仅增加了染料在水相体系中的溶解性,还显著减少了非特异性吸附,使其在生物标记、分子探针和蛋白质功能化方面具有广泛应用价值。
化学结构与性质
Sulfo-CY5-MAL的分子结构由三部分组成:
CY5荧光核心:提供强烈红光荧光,具有光稳定性高、量子产率大、适合长时间成像观察的特点。
马来酰亚胺基团(MAL):末端活性基团,可选择性与含巯基的分子反应,形成稳定的共价结合,常用于蛋白质、肽或小分子的标记。
磺酸基(Sulfo):增加水溶性和分子亲水性,使染料可在生物缓冲液中均匀分散,减少在疏水环境中的非特异性吸附。
这种结构兼具水溶性和高反应选择性,适用于多种水相生物实验和化学标记体系。Sulfo-CY5-MAL为极性化合物,在水和PBS缓冲液中具有良好的溶解性,也可在含少量有机溶剂的体系中使用。

光学特性
Sulfo-CY5-MAL的光学特性主要来源于CY5荧光核心,表现为:
吸收峰:约在650 nm,适合红光激发。
发射峰:约在670 nm,属于近红外区域,信号清晰且背景低。
量子产率:高,保证荧光标记的检测灵敏度。
光稳定性:优异,能够承受长时间激发而保持稳定荧光,适合连续成像或长时间追踪实验。
其红光荧光特点在生物成像中具有显著优势,可减少自发荧光干扰,并可与其他荧光探针进行多色标记实验。
化学活性与反应特性
马来酰亚胺基团是Sulfo-CY5-MAL的关键功能性位点,具有高度选择性和反应性:
巯基特异性反应
马来酰亚胺可与半胱氨酸的巯基反应,形成稳定的硫醚键。这种反应在中性pH下(约6.5–7.5)效率高,几乎不与氨基或羟基反应,保证标记的选择性。
温和条件偶联
反应条件温和,无需强酸或强碱,适合敏感蛋白质或多肽的标记,保持生物活性。
快速反应动力学
马来酰亚胺-巯基反应快速,可在短时间内完成标记,大幅提高实验效率。
磺酸基的引入使Sulfo-CY5-MAL在水性环境中分散良好,减少了染料分子间的非特异性聚集,从而保证标记均一性和荧光信号稳定性。
应用领域
蛋白质标记与荧光追踪
Sulfo-CY5-MAL可高效标记含半胱氨酸的蛋白质、多肽或酶,实现可视化追踪和定位,广泛应用于蛋白质动力学、结构研究和分子互作分析。
分子探针与生物分析
通过与特定生物分子结合形成荧光探针,可用于检测目标蛋白或分子,并进行定量分析。其红光荧光特性使其在多色标记实验中与其他荧光染料协同使用效果良好。
细胞与组织成像
近红外荧光信号穿透力强,可用于细胞、组织甚至体内成像研究。水溶性特性保证在生物体系中均匀分布,减少非特异性背景信号。
功能化材料开发
可通过马来酰亚胺-巯基反应将Sulfo-CY5-MAL固定于纳米材料、脂质体或聚合物表面,实现荧光功能化和生物追踪。
储存与使用注意事项
储存条件:避光、低温(–20°C)干燥保存,防止荧光衰减和化学降解。
溶解性:可直接溶于水、PBS缓冲液或少量有机溶剂体系中。避免长时间暴露于强酸或强碱环境。
操作安全:操作时应佩戴手套与护目镜,避免直接接触皮肤和眼睛,防止染料污染和过敏反应。
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