Sulfo-Cy3.5 NHS Ester（磺酸基-Cy3.5-活性酯）简介
Sulfo-Cy3.5 NHS Ester 是一种水溶性荧光染料衍生物，属于 Cy3.5 系列荧光染料 的 N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）形式。Cy3.5 属于 Cyanine 荧光染料家族，具有长波长发射特性，通常在 550–570 nm 激发下发射 570–590 nm 的荧光信号，而 Sulfo-Cy3.5 在 Cy3.5 的基础上引入了磺酸基团，提高了其在水相中的溶解性和生物相容性，减少了疏水性造成的自聚集问题。
化学结构与特性
Sulfo-Cy3.5 NHS Ester 的核心结构由三种部分组成：
Cyanine 荧光核心：双环或多环共轭结构，提供强烈、稳定的荧光发射。
磺酸基团（–SO₃⁻）：位于染料分子表面，使染料高度亲水，增强水溶性并减少疏水相互作用，改善在缓冲溶液及极性环境中的分散性。
NHS 活性酯（N-Hydroxysuccinimide ester）：反应性基团，可与含有一级胺的分子（如蛋白质、肽、寡核苷酸修饰端）发生共价偶联，生成稳定的酰胺键。
化学式大致可表示为 CₓHᵧNₓOₓSₓ，具体分子量根据不同供应商略有差异。其结构的共轭体系赋予了染料优异的光学性能，包括高荧光量子产率、较长的发射波长以及良好的光稳定性。
性质特点
水溶性优良：磺酸基团显著增强了染料在水相和极性缓冲液中的溶解性。
高反应性：NHS 活性酯可以快速、高效地与胺基反应，在室温或温和条件下即可完成偶联反应。
稳定性：干燥状态下储存时具有较好的稳定性，但在水溶液中 NHS 酯容易水解，因此通常建议现用现配。
光学特性：激发波长约为 550 nm，发射波长约为 570–590 nm，荧光亮度高，适合多色荧光实验或多通道标记应用。
应用领域
Sulfo-Cy3.5 NHS Ester 主要用于化学、生物化学及材料科学研究，常见应用包括：
蛋白质标记：通过 NHS 酯与蛋白质表面氨基反应，实现荧光标记，用于蛋白质追踪、定量或分子相互作用研究。
肽或多肽修饰：可与短肽中的胺基共价结合，形成稳定荧光标记肽，用于化学探针或分析研究。
核酸或寡核苷酸标记：通过含胺修饰的寡核苷酸末端进行偶联，便于荧光检测或分析。
纳米材料修饰：可将染料偶联到纳米粒子表面，实现荧光追踪或多功能材料制备。
多色荧光实验：与其他 Cy 系列或 Alexa 系列染料组合使用，进行多通道荧光成像或光谱分析。
使用注意事项
溶解与储存：Sulfo-Cy3.5 NHS Ester 通常在干燥状态下使用 DMSO 或干燥缓冲液溶解，溶解液应避光，低温储存（-20°C）。水溶液状态下 NHS 酯易水解，应尽快使用。
pH 控制：偶联反应适宜在 pH 7–9 的缓冲体系中进行，高于 pH 10 可能导致染料降解，低于 pH 6 则反应效率下降。
避光操作：染料易光漂白，应在避光条件下操作和储存。
安全防护：操作时建议佩戴手套和护目镜，避免直接接触皮肤和眼睛。NHS 酯对水敏感，应避免长期暴露于潮湿环境。
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