水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS)简介
水溶性-CY5-活性酯(Sulfo-CY5-NHS)是一种广泛用于分子标记和荧光检测的高性能染料衍生物。它是基于CY5荧光染料结构开发的活性酯形式,通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化,使其能够高效与含氨基的分子进行共价连接。与传统的CY5相比,Sulfo-CY5-NHS具有良好的水溶性,这是由于分子结构中引入了亲水性的磺酸基团,使其能够在水相体系中稳定存在而无需有机溶剂辅助。

化学结构与性质
Sulfo-CY5-NHS在化学上属于双环萘酰亚胺荧光染料,其核心结构为共轭双环体系,能够吸收近红外光并发射明亮的红光荧光。磺酸基团的引入不仅增强了水溶性,还显著降低了非特异性吸附,提高了染料在水溶液中的均匀分布。活性酯部分(NHS酯)能够在温和条件下与蛋白质、肽链或其他含初级胺的分子形成稳定的酰胺键,实现高效标记。
主要物理化学特性包括:
吸收波长:约649 nm
发射波长:约666 nm
分子量:约949 Da(根据不同厂家略有差异)
溶解性:高度水溶,可直接溶解于磷酸盐缓冲液或去离子水
稳定性:在冷藏干燥状态下可长期保存,避免光照和潮湿可延长寿命
使用特点
水溶性优异:Sulfo-CY5-NHS由于磺酸基团的存在,可以在水相环境下高效溶解,无需加入有机溶剂,这使得它在生物体系中使用更加安全方便。
高反应性与选择性:NHS酯在碱性条件下(pH 7–9)能够迅速与初级胺反应,形成稳定的共价酰胺键,标记效率高且反应条件温和,减少了对目标分子结构的干扰。
低非特异性结合:水溶性和磺酸基团结构减少了染料与非目标分子的非特异性吸附,保证了标记信号的特异性和精确性。
光学性能优良:CY5核心结构提供了强荧光信号和较长的荧光寿命,在多种荧光检测平台上具有良好的兼容性,如荧光光谱分析、成像系统以及荧光检测仪器。
应用灵活:可用于标记蛋白质、肽、多肽以及其他含初级胺的分子,还适用于纳米颗粒、聚合物和多功能载体的荧光标记。
应用领域
Sulfo-CY5-NHS因其出色的光学性能和水溶性,在科研和材料开发中得到广泛应用,包括但不限于:
荧光成像:用于检测和跟踪蛋白质、分子或纳米颗粒在溶液或复杂体系中的位置与分布。
分子标记与分析:通过共价标记,可进行分子定量分析、结构研究及动态监测。
生物传感器与纳米材料研究:结合荧光标记技术,可在水相条件下构建灵敏的荧光传感系统。
光谱学研究:其强荧光信号与稳定性使其适用于近红外光谱分析和高灵敏度检测。
储存与操作注意事项
为了保持Sulfo-CY5-NHS的性能,建议采取以下操作和储存条件:
避光保存:避免强光直射,以减少荧光衰减。
低温干燥:在-20℃或4℃下干燥保存,延长保存时间。
避免水分过多暴露:NHS酯对水分敏感,水解会降低活性,因此尽量在溶解前保持干燥状态。
操作时使用缓冲液:标记反应通常使用pH 7–9的缓冲液,确保反应高效进行。
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