Sulfo-CY3-SH 是一种水溶性荧光染料衍生物,由 Cyanine 3(CY3) 磺化处理后引入巯基(-SH)形成的分子。其化学设计结合了 CY3 的高荧光效率、磺化基团的水溶性以及巯基的反应活性,使其成为生物标记、蛋白质修饰及分子探针研究的重要工具。Sulfo-CY3-SH 在化学结构上属于 Cyanine 类荧光染料,通过巯基可与多种生物分子(如蛋白质的半胱氨酸残基)形成稳定的共价连接,同时磺化处理增强了染料在水溶液中的可溶性和生物相容性。
化学结构与性质
Sulfo-CY3-SH 的核心是 CY3 染料,这是一种窄带红色荧光染料,最大激发波长约为550 nm,发射波长约为570 nm,具有高荧光量子产率和良好的光稳定性。通过磺化修饰,在 CY3 分子上引入一个或多个磺酸盐(-SO3⁻)基团,使其整体带负电荷,从而显著提高了染料在水溶液中的溶解性,减少了在生物体系中非特异性结合和聚集的可能性。
巯基(-SH)是 Sulfo-CY3-SH 的另一重要特征。巯基具有较高的化学活性,可与马来酰亚胺、卤代烷、二硫键交换等多种反应性基团进行共价结合。因此,Sulfo-CY3-SH 可方便地标记蛋白质、肽链、抗体或其他含有半胱氨酸残基的生物分子,实现荧光追踪和检测功能。
物理化学性质方面,Sulfo-CY3-SH 呈红色荧光,易溶于水及含极性溶剂体系(如 PBS 缓冲液),其水溶性使其在生物实验中无需有机溶剂即可使用,降低了对生物样品的潜在干扰。此外,其磺化基团和巯基结合,使染料在水性环境中稳定,不易沉淀或自聚集。

主要应用
蛋白质和肽标记:Sulfo-CY3-SH 可与蛋白质或肽链的半胱氨酸残基共价结合,实现荧光标记。标记后的蛋白质可以在荧光显微镜、流式细胞术或酶标分析中被直接检测,适用于蛋白定位、动态追踪及相互作用研究。
荧光共振能量转移(FRET)研究:由于 CY3 具有良好的激发-发射特性,Sulfo-CY3-SH 常作为 FRET 供体或受体,用于研究分子间相互作用、构象变化及生物复合物形成。
细胞成像与追踪:水溶性的 Sulfo-CY3-SH 可用于标记细胞膜蛋白或胞内蛋白,实现实时荧光成像,观察细胞内蛋白分布、转运及动态过程。
生物传感与分析:Sulfo-CY3-SH 的巯基可参与多种生物化学反应,如检测氧化还原状态、巯基活性或结合特定反应底物,为分子传感器开发提供工具。
纳米材料修饰:在纳米颗粒、脂质体或聚合物载体表面引入 Sulfo-CY3-SH,可赋予其荧光信号,实现体外或体内追踪与定量分析。
使用与储存注意事项
Sulfo-CY3-SH 对光敏感,暴露在光线下可能导致荧光强度下降,因此需避光保存。通常建议在-20°C避光干燥条件下长期储存。使用时,应在暗处或使用遮光容器操作,并避免长时间暴露于空气中,以减少氧化对巯基活性的影响。配制水溶液时,pH 过高或过低可能影响巯基稳定性,一般推荐在中性缓冲液中操作。
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