CY5.5-Dextran MV：4000 菁染料cy5.5葡聚糖 MV：4000
菁染料CY5.5标记葡聚糖（CY5.5-Dextran），分子量（MV）为4000，是近红外荧光染料CY5.5与葡聚糖通过共价键结合形成的荧光探针，外观为深蓝色至蓝黑色粉末，兼具CY5.5的近红外荧光性能与葡聚糖的生物相容性、水溶性及分子量依赖性渗透特性，主要用于生物医学科研领域的体内外示踪、血管成像、通透性检测等实验，严禁用于人体临床、诊断或治疗用途，仅作为科研试剂使用。本使用说明详细介绍其产品特性、使用方法、操作注意事项及储存条件，确保实验操作规范、结果准确可靠，同时补充试剂相关的实验优化技巧与常见问题解决方案，助力科研人员高效开展实验。
产品核心特性方面，本品的光学性能由CY5.5基团决定，激发波长约为675 nm，发射波长约为694 nm，处于近红外光区域，具有穿透力强、背景荧光干扰小、荧光强度高的显著优势，可满足深层组织成像和活体血管成像的实验需求，这也是其区别于可见光荧光探针的核心优势。葡聚糖作为天然多糖载体，具有无毒性、生物相容性好、不易被生物降解等特点，CY5.5的标记使其可通过近红外荧光信号实现对葡聚糖的精准追踪，且分子量为4000的葡聚糖属于小分子葡聚糖，可穿过毛细血管壁进入组织间隙，特别适合用于组织渗透研究、血脑屏障通透性评估等实验场景。此外，本品水溶性优良，无需借助有机溶剂，可直接用生理盐水、PBS缓冲液等水性溶剂配制工作液，避免了有机溶剂对生物体系的毒性影响，更适合活体实验和活细胞研究；同时具有较好的抗光漂白能力，在近红外激发光照射下，可保持稳定的荧光信号，适合长时间连续观测和动态追踪。
使用前需做好准备工作:
首先检查试剂外观，若出现结块、变色（非深蓝色至蓝黑色）或吸潮严重等情况，说明试剂可能已变质，严禁使用。实验前需准备好相关实验器材，包括无菌离心管、移液枪、搅拌器、0.22 μm滤膜、生理盐水（0.9% NaCl）、PBS缓冲液（pH 7.2-7.6）、近红外活体成像系统、荧光分光光度计、细胞培养箱等，所有器材需经无菌处理，避免污染试剂影响实验结果。同时需根据实验类型（活体实验、细胞实验、组织实验）确定所需试剂用量，提前计算好工作液浓度，避免试剂浪费。
具体使用方法:
需根据实验类型调整，核心操作流程如下：第一步，配制工作液，取适量CY5.5-Dextran粉末，加入预冷的生理盐水或PBS缓冲液（pH 7.2-7.6），室温下轻柔搅拌10-15分钟至完全溶解，配制浓度为1-10 mg/mL的工作液，溶解后通过0.22 μm滤膜过滤，去除杂质和不溶物，过滤后的工作液需立即使用或避光冷藏。第二步，活体实验操作，若用于小鼠血管成像或组织渗透实验，通过尾静脉注射将工作液导入动物体内，注射剂量根据动物体重调整，通常为5-20 mg/kg，注射后立即用近红外活体成像系统检测，可连续观测数小时至数天，追踪血管内或组织内荧光信号的变化；若用于大鼠实验，可通过耳缘静脉注射，注射剂量可适当调整，确保荧光信号清晰可检测。第三步，细胞实验操作，将配制好的工作液加入细胞培养体系，工作液终浓度为0.1-1 mg/mL，37℃、5% CO₂细胞培养箱中孵育2-24小时，孵育结束后，用PBS缓冲液洗涤细胞3-4次，去除未被细胞摄取的游离试剂，随后通过荧光显微镜观察细胞内荧光分布，或用流式细胞仪定量分析吞噬效率。第四步，组织通透性实验操作，注射探针后，在不同时间点取目标组织，匀浆后用荧光分光光度计检测组织中荧光强度，计算通透性指标，对比不同组别的差异。
操作注意事项：
是确保实验成功的关键，需严格遵循以下要求：一是避光操作，CY5.5基团对光敏感，试剂粉末、配制好的工作液及实验样本均需避光处理，储存时置于-20℃避光密封保存，粉末状态下稳定性较好，溶解后的工作液需现配现用，若需短期保存（<24小时），可置于4℃避光环境，避免光漂白导致荧光信号衰减。二是剂量控制，活体实验中，注射剂量需严格控制，过量可能导致血液黏度增加，影响血流动力学，同时避免探针在肾脏、肝脏等器官过度富集，进而影响实验结果；细胞实验中，工作液浓度过高可能产生非特异性结合，过低则荧光信号微弱，需通过预实验优化浓度。三是无菌操作，所有与试剂接触的器材均需无菌处理，避免微生物污染，影响试剂活性和实验结果；若试剂不慎污染，需立即丢弃，不可继续使用。四是检测条件，检测时需选用近红外专用通道，设置对应激发和发射波长（激发675 nm、发射694 nm），避免与其他荧光信号干扰，确保检测结果准确。五是安全操作，操作过程中需佩戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和呼吸道，若不慎接触，需立即用大量清水冲洗；实验结束后，妥善处理废弃试剂和实验耗材，符合实验室环保要求。
储存条件方面：
未开封的CY5.5-Dextran MV：4000试剂，需置于-20℃避光、干燥、密封环境中保存，保质期为12个月，超过保质期后需检测荧光强度，若荧光强度衰减超过30%，则不可使用；已开封的试剂，需密封后置于-20℃避光保存，尽量在1个月内用完，避免吸潮、氧化导致试剂变质。此外，试剂储存过程中需避免反复冻融，反复冻融会破坏CY5.5与葡聚糖的共价结合，导致荧光强度下降和试剂活性降低，若需分多次使用，可将试剂分装成小份，单次使用一份，剩余部分立即冷冻保存。
补充说明：本品分子量为4000，属于小分子葡聚糖探针，可穿过正常毛细血管壁进入组织间隙，适合用于组织渗透、血脑屏障通透性评估等研究，与中大分子（>40 kDa）CY5.5-葡聚糖（主要滞留于血管内，用于血管成像）形成明确区分，科研人员需根据实验需求精准选择。实验过程中，若出现荧光信号微弱，可适当提高工作液浓度或延长孵育/注射后的观测时间；若出现非特异性荧光，可增加洗涤次数，或设置阴性对照组排除干扰。同时，本品可与FITC标记试剂搭配使用，实现多色荧光成像，助力更复杂的实验研究。
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