CY7-葡萄糖,Cy7-Glucose这种功能化荧光探针
CY7-葡萄糖(Cy7-Glucose,CY7-Glc)是由近红外荧光染料CY7与天然单糖葡萄糖通过共价偶联形成的功能化荧光探针,融合了CY7的近红外成像优势和葡萄糖的生物活性、水溶性,是一种适用于体内外糖转运示踪、代谢成像、肿瘤靶向研究的高效荧光试剂,广泛应用于生物医学、细胞生物学、药物研发等科研领域,其核心特点是组织穿透深度大、背景干扰低、能够模拟葡萄糖的天然代谢特性,实现对深层生物过程的精准追踪。
化学结构上:
CY7-葡萄糖由两个核心部分通过共价键稳定连接:一是CY7荧光染料核心,属于七亚甲基花菁类染料,具有长共轭链结构,这是其近红外光学性能的来源,能够在近红外区域产生强吸收和发射;二是葡萄糖分子,作为细胞代谢的主要能量来源,具有六元环结构和多个羟基,不仅赋予其良好的水溶性、生物相容性和生物活性,还为与CY7的偶联提供了丰富的反应位点。偶联方式主要有两种:一种是将葡萄糖进行氨基化修饰,形成葡萄糖胺,再与CY7-NHS酯发生酰胺化反应,形成稳定的酰胺键;另一种是将葡萄糖还原生成醛基,通过肟键或亚胺键与CY7的氨基反应实现共价连接。偶联过程温和,严格控制反应条件,确保不破坏CY7的荧光性能和葡萄糖的生物活性,使产物能够被细胞通过葡萄糖转运蛋白特异性摄取。

理化特性方面:
CY7-葡萄糖的光学性能优良,继承了CY7的近红外特性,激发波长约为750nm,发射波长约为770-800nm,处于生物组织的“近红外窗口”(700-850nm),该波段光线在生物组织中的穿透深度可达数厘米,且生物样品自身荧光干扰很低,能够实现深层组织和体内的高清晰度成像。荧光性能上,CY7具有高摩尔消光系数(约2-3×10⁵ M⁻¹·cm⁻¹)、优良的光稳定性和荧光量子产率,不易发生光漂白,适合长时间连续观测和低浓度样品检测。水溶性上,得益于葡萄糖分子的多个羟基,CY7-葡萄糖具有良好的水溶性,可在水、PBS缓冲液等水相体系中均匀溶解,无需有机共溶剂辅助,避免了有机溶剂对生物样品的损伤,同时减少了染料聚集导致的荧光淬灭。此外,该试剂化学稳定性好,在中性至弱碱性缓冲液中(pH 7.0-8.0)能够保持稳定的结构和荧光性能,生物相容性优良,对细胞和生物体毒性很低,无明显免疫原性。
制备方法:
注重高效偶联和高纯度纯化,核心步骤如下:第一步,原料准备与活化,葡萄糖可通过羟基氨基化或还原生成醛基进行修饰,增强与CY7的偶联效率;CY7通常采用CY7-NHS酯或异氰酸酯形式,提供活性官能团用于偶联;第二步,偶联反应,将活化后的CY7缓慢加入含修饰葡萄糖的缓冲液中(pH 7-8),室温避光轻柔搅拌数小时,调节CY7与葡萄糖的摩尔比(通常1:1至1:3),避免多重偶联导致的聚集或荧光淬灭;第三步,纯化过程,反应结束后,通过透析(分子量截留1-3kDa)或分子量截滤,去除未反应的小分子CY7和副产物,再采用高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤(Sephadex G-10/G-25)进一步纯化,收集含CY7-葡萄糖的洗脱峰;第四步,结构和性能验证,通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱确认偶联成功,利用核磁共振(NMR)或质谱分析偶联位点及结构完整性,同时进行水溶性和稳定性测试,确保产品适用于生物实验。
应用领域:
主要集中在体内成像、糖代谢研究和肿瘤靶向:在糖代谢研究中,可作为葡萄糖代谢的模拟探针,用于追踪细胞对葡萄糖的摄取、转运和代谢过程,探究糖代谢异常与肿瘤、糖尿病等疾病的关联,尤其适合肿瘤细胞代谢研究(肿瘤细胞对葡萄糖摄取量显著高于正常细胞);在体内近红外成像中,可用于小动物体内肿瘤成像、器官代谢成像、血管造影等,实现肿瘤的精准定位和代谢状态监测,也可用于追踪葡萄糖在体内不同器官的分布和代谢动态;在药物研发中,可用于筛选调节葡萄糖代谢的药物候选物,监测药物对葡萄糖转运和代谢的影响,还可作为荧光示踪剂,标记药物递送系统,实时监测载体在体内的分布和药物释放过程;此外,还可用于糖生物学研究,探究葡萄糖在生物体内的生理功能,以及与蛋白质、核酸等生物分子的相互作用。保存条件为-20℃、避光、干燥密封,避免光照、潮湿和高温,纯化后的产品可长期保存,母液配制后应尽快使用。
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