FITC-HRP 荧光素标记辣根过氧化物酶
FITC-HRP（荧光素标记辣根过氧化物酶）是将异硫氰酸荧光素（FITC）与辣根过氧化物酶（HRP）通过共价偶联制备而成的双功能荧光标记酶制剂，兼具FITC的荧光可视化功能与HRP的酶促催化活性，是免疫检测、生物成像、分子生物学等科研领域的核心工具试剂。本产品标记效率高、酶活性保留完好、荧光稳定性强，可实现荧光信号与酶促信号的双重检测，大幅提升实验灵敏度与准确性，仅用于科研用途，不可用于人体实验及临床诊断。
产品核心特性突出，性能优势显著。FITC是一种常用的绿色荧光染料，激发波长约495nm，发射波长约520nm，荧光信号明亮、光稳定性好、荧光量子产率高，且水溶性优良，可在多种缓冲体系中稳定存在，便于实验操作；同时，FITC的荧光颜色清晰，可与其他近红外荧光染料形成区分，适用于多通道荧光成像实验。辣根过氧化物酶（HRP）是一种来源于辣根的血红素酶，分子量约44kDa，由单链或二聚体多肽组成，含有约308个氨基酸残基，其分子结构中包含多肽链、血红素辅基及多个氨基酸残基，可高效催化过氧化氢分解反应，同时具有底物特异性强、催化效率高、稳定性好的特点，是免疫检测中常用的标记酶之一。
本产品采用高效温和的共价偶联工艺制备，严格控制反应条件，确保产品质量均一可靠。偶联原理是利用FITC分子中的异硫氰酸酯基团（-NCS）与HRP分子中的赖氨酸残基的ε-氨基或N端氨基发生共价反应，形成稳定的硫脲键（–NH–C(=S)–NH–），将FITC荧光团稳定连接到HRP分子上。制备过程中，首先将HRP溶解于pH8.5±0.5的碳酸氢钠缓冲液中，控制蛋白浓度在适宜范围，且确保缓冲液中不含伯胺（如Tris或甘氨酸）和铵离子，避免影响标记效率；随后将FITC溶解于无水DMSO中，制备成10mM储备液，经活化处理后缓慢加入到HRP溶液中，控制二者摩尔比，室温避光孵育60分钟，期间定期轻轻颠倒混匀；最后通过透析、凝胶过滤层析等纯化工艺，去除未反应的游离FITC染料及小分子杂质，确保产品纯度≥95%。
偶联过程温和，可有效保留HRP的酶催化活性（保留率≥90%），同时不影响FITC的荧光性能，标记密度可根据实验需求灵活调控，既保证充足的荧光信号，又不会因标记密度过高影响HRP的酶活性。产品具有良好的水溶性，可在PBS、Tris-HCl等常用缓冲体系中稳定存在，不易聚集，便于各种实验场景的应用。
应用领域广泛，适配多种科研需求。在免疫荧光检测领域，FITC-HRP可作为荧光标记二抗或酶标试剂，用于免疫组化、细胞免疫荧光、Western Blot等实验，通过荧光显微镜可清晰观察目标抗原在细胞或组织中的定位与分布，同时利用HRP的酶促催化活性，可催化底物产生颜色反应或化学发光信号，实现荧光信号与酶促信号的双重检测，大幅提升检测灵敏度，适用于低表达抗原的检测研究。在酶联免疫吸附测定（ELISA）中，可作为酶标二抗，结合FITC的荧光特性与HRP的酶促放大功能，实现双重信号放大，进一步提高检测的灵敏度与特异性，广泛应用于蛋白质、抗体、抗原等生物分子的定量检测。
在生物成像领域，FITC-HRP可用于细胞内酶活性成像、蛋白追踪等研究，通过荧光信号可视化HRP在细胞内的分布及转运过程，同时利用酶促催化活性，可实现酶活性的原位检测，为细胞生物学机制研究提供有力支持。此外，还可用于生物传感器的构建，作为信号报告分子，结合荧光检测与酶促检测，实现对目标物质的高灵敏度检测，广泛应用于分子诊断、环境监测等科研方向。使用时需注意，实验过程中需全程避光操作，避免FITC发生光漂白，影响荧光信号强度；HRP的酶活性受温度、pH值影响较大，建议在37℃、pH7.0-7.5的条件下进行酶促反应。
使用与储存说明清晰，便于实验操作。本产品为液体形态，规格可选1mL、5mL、10mL，浓度可根据实验需求定制。使用时无需复溶，可直接用缓冲液稀释至所需浓度，轻轻颠倒混匀即可。实验过程中需全程避光，稀释后的试剂建议现配现用，避免长时间放置导致酶活性下降及荧光信号衰减。储存时，密封置于-20℃避光环境中，建议分装储存，避免反复冻融，防止HRP变性及FITC荧光性能下降；短期运输可采用冰袋冷藏（2-8℃），长期运输需采用干冰冷冻。产品保质期为1年，使用前请核对产品批次及保质期，严格按照说明书操作规程进行实验，如有技术问题可咨询专业技术人员。
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