CY5-MAL,CY5马来酰亚胺蛋白质、抗体标记——巯基特异性近红外荧光标记试剂
CY5-MAL(CY5马来酰亚胺)是一种专门针对含有巯基(-SH)的生物分子设计的近红外荧光标记试剂,其分子结构由CY5荧光母体和马来酰亚胺(MAL)活性基团组成,主要用于蛋白质、抗体、多肽等生物分子的特异性荧光标记,广泛应用于生物医学、分子生物学、免疫学等领域的蛋白相互作用研究、荧光成像、药物递送监测等实验。与CY5-NHS酯针对氨基标记不同,CY5-MAL具有巯基特异性标记优势,可在温和条件下与生物分子中的巯基发生特异性反应,形成稳定的硫醚键,标记过程不影响生物分子的天然活性,且荧光信号稳定、背景干扰低。
该产品的核心优势在于巯基特异性和高效标记性能。马来酰亚胺基团是一种高活性的巯基反应试剂,其与巯基的反应具有高度特异性,仅在中性pH环境(pH6.5-7.5)下与巯基发生反应,不与氨基、羟基、羧基等其他生物分子基团发生非特异性结合,可有效避免非特异性荧光干扰,提高实验结果的准确性和可靠性。同时,该反应速度快、偶联效率高,通常在室温下反应30分钟至1小时即可完成,偶联效率可达90%以上,且反应产物稳定,不易水解,可长期保存。CY5-MAL继承了CY5染料的近红外荧光特性,激发波长约650nm,发射波长约670nm,组织穿透能力强、光稳定性好,适合深层组织成像和活体动物成像。

在蛋白质、抗体标记应用中,CY5-MAL具有独特的优势。许多蛋白质和抗体分子中含有游离的巯基,或者可通过还原二硫键(-S-S-)获得巯基,为CY5-MAL的标记提供了反应位点。例如,抗体分子的铰链区含有二硫键,通过还原剂(如DTT、TCEP)还原后,可产生游离巯基,与CY5-MAL发生特异性偶联,标记后的抗体不仅保留了其特异性识别抗原的活性,还被赋予了近红外荧光示踪能力,可用于免疫荧光成像、流式细胞术检测、肿瘤靶向成像等实验。在蛋白质相互作用研究中,可将CY5-MAL标记在一种蛋白质上,将另一种蛋白质进行其他标记,通过荧光共振能量转移(FRET)等技术,探究两种蛋白质之间的相互作用机制。
CY5-MAL的理化性质稳定,易溶于DMSO、DMF等有机溶剂,微溶于水,使用时可将其溶解于有机溶剂中,再缓慢加入到含有巯基的生物分子溶液中,控制反应条件(pH6.5-7.5、室温),避免高温、强光和强酸碱环境,防止马来酰亚胺基团水解和荧光淬灭。反应完成后,可通过透析、凝胶过滤、超滤等纯化方法,去除未反应的CY5-MAL和还原剂,获得纯化的荧光标记生物分子。该产品在4℃避光、密封条件下可保存6个月以上,标记后的生物分子在-20℃避光条件下可长期保存,不影响其荧光性能和生物活性。
此外,CY5-MAL还可用于多肽标记、酶标记等领域,例如,标记含有巯基的生物活性多肽,追踪多肽在体内的分布、代谢过程,探究多肽的作用机制;标记酶分子,用于酶活性检测和酶促反应过程监测。作为一种巯基特异性的近红外荧光标记试剂,CY5-MAL填补了氨基特异性标记试剂的不足,为生物分子的精准标记提供了新的选择,推动了生物医学研究中蛋白标记、成像监测等技术的发展,在科研和临床领域具有广阔的应用前景。
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